омединов и цитогенов показало множество сходных эффектов при их воздействии на различные органы и ткани организма в норме и патологии. Так, пептиды вилон и эпи-талон, созданные на основе анализа соответственно тималина и эпиталамина, способствовали увеличению продолжительности жизни и снижению частоты возникновения спонтанных опухолей, что полностью соответствует резуль-там экспериментов с комплексными препаратами тимуса и эпифиза (Анисимов В. Н. и др., 2001, 20026). Следует отметить, что использованные в указанных экспериментах дозировки цитогенов были, как правило, в 1000 раз меньше, чем при изучении цитомединов. Более того, было показано, что

177

цитогены in vivo и in vitro также обладают тканеспецифи-ческим и геропротекторным действием (Хавинсон, Мыльников, 2000; Хавинсон и др., 20006; Анисимов В. Н. и др., 2002). Исследование влияния цитогенов на морфофункцио-нальные характеристики различных органов показало тка-неспецифический протекторный эффект вилона и эпитало-на по отношению к структурной сохранности сосудов и нормализации микроциркуляторных расстройств в этих органах (Хавинсон и др., 2001д). В экспериментальных исследованиях было также установлено, что эпиталон восстанавливает уровень мелатонина и кортизола и компенсирует нарушения нейроэндокринной регуляции у старых обезьян (Хавинсон и др., 20016).

Применение пептидных биорегуляторов позволяет направленно воздействовать на пораженный орган. В связи с этим важно отметить мнение Р. В. Петрова о том, что регуляторные пептиды являются лечебными препаратами нового поколения, осуществляющими природно-направленное корригирующее действие без побочных эффектов (Петров и др., 2000).

По нашим представлениям, пептидные биорегуляторы обладают свойством контролировать экспрессию генов и процессы синтеза белка в клетках. Так, например, при изучении действия синтетического пептида печени на кинетику синтеза белка в монослойной культуре гепатоцитов крыс разного возраста установлено восстановление под влиянием пептида интенсивности и ритма белкового синтеза (Бродский и др., 2001). На основании полученных результатов следует предположить, что геропротекторное действие коротких пептидов связано с восстановлением в клетках процессов биосинтеза белков. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что пептидные биорегуляторы способны также изменять функциональную активность генома на различных стадиях клеточного цикла и воздействовать на процессы синтеза мРНК, которая обеспечивает синтез специфических клеточных белков (Морозов и др., 2000а). Это тем более важно, если учесть определяющую роль генетического аппарата в механизмах развития многих заболеваний (Бочков и др., 2002).

При осложненных психофизиологических состояниях пожилых людей с патологическим типом старения требуется оптимизация способов введения пептидных препаратов в организм. Кроме препаратов для инъекций разработаны лекарственные формы РП для трансдермального и перорального применения (Chien, 1992).

178

Как известно, кожа человека обладает не только развитой сенсорной системой, но и системой капиллярного транспорта биологически активных компонентов. Регуляция транс-дермальных потоков извне через кожу в лимфатическую систему и в кровоток поддерживается гидрофильно-липо-фильным балансом между эпидермисом и стенками сосудов. Определенные сдвиги в состоянии нервной и эндокринной систем у лиц пожилого возраста приводят к изменениям физиологических функций кожи. Снижается влагосодержа-ние кожи, замедляется отшелушивание рогового слоя клеток, в эпидермисе и дерме уменьшается содержание мукополи-сахаридов, холестерина и фосфолипидов. В этих условиях тканеспецифические липосомальные кремы, содержащие РП, служат не только средством целенаправленной доставки РП в организм, но и компенсируют снижение влагосодер-жания и фосфолипидов в составе дермы (Chien, 1992).

Разработка пероральных форм пептидных гормонов и регуляторов базируется на создании их молекулярных комплексов с полимерным носителем, который защищает пептид от воздействия кислой среды желудочного сока и от разрушительного действия гидролитических ферментов желудочно-кишечного тракта (Davis, 1990). При этом в качестве полимера-носителя могут быть использованы как синтетические гидрофильные сополимеры (Akala et al., 1998), так и биополимеры растительного и животного происхождения: эфиры целлюлозы, декстранов и других углеводов, мукополисахариды, РНК и ДНК.

На ранних этапах изучения нуклеиновых кислот в качестве лечебных средств при лучевых поражениях организма и при возрастных дисфункциях головного мозга недооценивалась роль пептидных примесей, которые были прочно связаны с нуклеиновыми кислотами и всегда присутствовали в изучаемых препаратах нуклеиновых кислот (Федорова и др., 1974). При перораль-ном применении препаратов дрожжевой РНК, не очищенных от пептидов, у пожилых пациентов наблюдалось улучшение мозговых процессов, в том числе восстанавливалась память (Cameron et al., 1963). Как уже указывалось в главе 3, нуклеиновые кислоты и их тканеспецифические комплексы могут поглощаться клетками по механизму эндоцитоза и проникать в клеточное ядро (Глебов, 1987). Дальнейшая судьба экзогенных нуклеиновых кислот в клетке не совсем ясна, но можно предполагать, что нуклеопротеиновые комплексы, защищенные от разрушения ферментами в лизосомах, принимают участие в процессах репарации ДНК хроматина.

179

Использование нуклеиновых кислот в качестве носителей регуляторных пептидов при создании пероральных лекарственных форм особенно перспективно на современном уровне представлений о роли факторов транскрипции в ауто-кринной саморегуляции клеточных популяций (Alberts et al., 1994)

Физико-химические свойства изученных нами модельных и природных комплексов ДНК с регуляторными пептидами и белками были детально представлены в разделе 3.3. Для практического применения необходимо было провести оценку их биологической активности и тканеспеци-фичности.

Клетки различных органов и тканей отличаются по набору мембранных рецепторов. Наряду с рецепторами, которые необходимы для обеспечения жизни клеток на всех этапах развития организма, дифференцированная клетка на стадии интерфазы обнаруживает тканеспецифические рецепторы, ответственные за связывание специфических лигандов (см. раздел 2.2).

Для исследования специфического связывания биологически активных макромолекул с клеточными рецепторами широко применяются методы аффинной хроматографии. Основной недостаток обычных аффинных сорбентов — низкая эффективность использования специфических рецепторов при их химической пришивке к пористому инертному носителю, а также потеря нативности и некоторых физиологических функций рецепторов из-за процедуры химической модификации. В литературе описан метод получения аффинных сорбентов на основе фрагментов клеточных мембран эритроцитов, лимфоцитов и гепатоцитов, иммобилизованных в матрицу полиакрилонитрила. Эти сорбенты проявляют высокую тканеспецифическую селективность связывания своих природных белков-лигандов (Грушка и др., 19