Биологический каталог




Иммунология. Том 3

Автор У.Пол

5. Диагностика и терапия

Исключительная специфичность моноклональных антител стимулировала новые исследования, касающиеся радиологического сканирования опухолей и метастазов. При использовании данного метода опухолеспецифические моноклональные антитела метят каким-либо радиоактивным изотопом и инъецируют в малых дозах в тело больного, после чего с помощью радиографических методов анализируют распределение метки. Изотопы, связанные с моноклональ-ными антителами, можно обнаружить внутри и вокруг опухолей, которые удается таким образом локализовать. Возможности данного метода уже были продемонстрированы на животных <[92] (рис. 28.5). Помимо прямой локализации опухолей и метастазов использование меченых моноклональных антител может повысить чувствительность выявления в жидкостях организма растворимых опухолевых продуктов, например карциноэмбрионального антигена или аль-фа-фетопротеина [93].

По-видимому, наиболее успешно моноклональные антитела можно использовать для проведения эффективной иммунотерапии против неопластических

28. Гибридомы и моноклональные антитела клеток. В этом случае опухолеспецифические антитела конъюгируют с метаболическим ядом или с радиоактивным изотопом, характеризующимся высокой энергией эмиссии; при внутривенном введении эти антитела направляются прямо на опухолевые клетки аналогично тому, как это происходит при выявлении опухолей. Кроме того, антитела можно еще использовать для уничтожения опухолевых клеток в результате комплемент-зависимого лизиса. В послед-

Рис. 28.5. Сцинтиграфическое сканирование мыши — носителя опухоли после введения ей меченных 1311 моноклональных антител, специфичных к предварительно трансплантированной тератокарциноме. (Фотография предоставлена Ballou.) Более детально метод описан в работе того же автора [92].

нее время появилось несколько сообщений о попытках иммунотерапии больных с лимфоидными опухолями с помощью данного метода. До сих пор проблемы, связанные с антигенной модуляцией и образованием комплексов, создают, по-видимому, главные трудности для использования подходов такого рода, хотя имеется несколько предварительных сообщений об успешном использовании этих подходов для лечения больных [85, 94—96]. Можно надеяться, что дальнейшие эксперименты на животных повысят эффективность иммунотерапии.

28.5. Распознавание эпитопов моноклональными

антителами

Как уже говорилось при обсуждении общих вопросов, связанных с получением гибридом, уникальным свойством моноклональных антител является их способность узнавать один эпитоп в сложной антигенной структуре. Это Д. Ф. Кирней

дает в руки экспериментатору мощное средство биологического анализа сложных структур. В то же время очевидно, что данное уникальное свойство моноклональных антител повышает вероятность обнаружения неожиданного иммунологического перекреста. В последнее время появилось множество сообщений о моноклональных антителах, перекрестно реагирующих с неродственными молекулами. Было показано, что крысиные моноклональные антитела 41—21, полученные путем иммунизации крысы клетками мышиной Т-лимфомы, связываются с молекулой Tliyl, а также с Ук-идиотипической детерминантой белка ТЕРС15 мышиной миеломы [97]. Моноклональные антиидиотипические антитела, направленные против фосфорилхолин (ФХ)-специфичного белка ТЕРС15, как оказалось, взаимодействуют еще и с С-реактивным белком человека (сывороточный белок острой фазы, CRP), реагирующим также с фосфорилхолином. Связывание CRP и с фосфорилхолином, и с антиидиотипическими антителами является Са2+-зависимым, причем в обоих случаях оно разрушается в присутствии ЭДТА. В то же время связывание антител 41—42 с ТЕРС15 не зависит от Са2+ [98]. Другие мышиные моноклональные антитела, полученные путем иммунизации мыши человеческим CRP и связывающиеся с CRP Са2+-зависимым способом, как было показано, весьма специфично узнают структуру на поверхности моноцитов периферической крови человека. Более того, эти антитела реагируют с внутриклеточными филаментами в человеческих и мышиных клетках различных типов. Можно предположить, что данные антитела узнают некий универсальный Са2+-связывающий эпитоп [99]. Про другие моноклональные антитела известно, что они перекрестно реагируют с цитоскелетными белками тропомиозином и виментином [100].

Подобные перекрестные реакции не являются неожиданными, если учитывать разницу между гетерогенными и моноклональными антителами, продемонстрированную на рис. 28.1. Моноклональные антитела проявляют специфичность по отношению к определенному эпитопу молекулы. Этот эпитоп представляет собой трехмерную структуру и может обнаруживаться не только у родственных, но и у неродственных молекул.

Таким образом, важно отметить, что при идентификации молекулы нельзя исходить лишь из ее взаимодействия с одним типом моноклональных антител, а необходимо учитывать и другие данные, характеризующие молекулу. С другой стороны, наличие иммунологического перекреста может свидетельствовать о наличии важных структурных и биологических гомологии между макромолекулами.

ЛИТЕРАТУРА

1. Potter М. Immunoglobulin-producing tumors and myeloma proteins of mice, Physiol. Rev., 5 , 631 (1972).

2. Potter M. Antigen-binding myeloma proteins of mice, Adv. Immunol., 25, 141 (1978).

3. Pettengill G. S., Sorensen G. D. Murine myeloma cells in suspension culture, Exp. Cell Res., 47, 608 (1967).

4. Laskov R., Scharff M. D. Synthesis, assembly and secretion of gamma globulin by mouse myeloma cells, J. Exp. Med., 131, 515 (1970).

5. Horibata K., Harris A. W. Mouse myelomas and lymphomas in culture, Exp. Cell Res., 60, 61 (1970).

6. Ringertz N. R., Savage R. E. Cell Hybrids, Academic Press, New York, 1976.

7. Barski G., Sorieul S., Cornefert F. «Hybrid» type cells in combined cultures of two different mammalian cell stains, J. Natl. Cancer Inst., 26, 1269 (1961).

8. Li ttlefieldJ. W. Selection of hybrids from matings of fibroblasts in vitro and their presumed recombinants, Science, 145, 709 (1964).

9. Harris H., Watkins J. F. Hybrid cells derived from mouse and man: Artificial hetero-karyons of mammalian cells from different species, Nature, 205, 640 (1965).

10. Okad Y., Murayama F. Multinucleated giant cell formation by fusion between cells of two different strains, Exp. Cell. Res., 40, 154 (1965).

28. Гибридомы и моноклональные антитела 11. Poole A. R., Howell J. I., Lucy J. A. Lysolecithin in cell fusion, Nature, 227, 810 (1970).

12. Pontevorco C. Production of indefinitely multiplying mammaliam somatic cell hybrids by polyethylene glycol (PEG) treatment, Somatic Cell Genet., 1, 397 (1976).

13. Cotton R. G. H., Milstein C. Fusion of two immunoglobulin producing myeloma cells, Nature, 244, 42 (1973).

14. Kohler В., Milstein C. Continuous culture of fused cells secreting antibody of predefined specificity, Nature, 256, 495 (1975).

15. Margulies D. H., Kuehl W. M., Scharff M. D. Somatic cell hybridization of mouse myeloma cells, Cell, 8, 405 (1976).

16. Milstein C, Kohler G. Cell fusion and the derivation of cell lines producing specific antibody. In: Antibodies in Human Diagnosis and Therapy, ed. by E. Haber and R. M. Krause, p. 271, Raven Press, New York, 1977.

17. Milstein C, Adetugbo K., Cowan N. J., Kohler G., Secher D. S., Wilde C. D Somatic cell genetics of antibody secreting cells: Studies of clonal diversification and a.nalysis by cell fusion, Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 41, 793 (1977).

18. Margulies D. H., Cieplinski W., Dharmgrongartama В., Gefter M. L., Morrison S. L ., Kelly Т., Scharff M. D. Regulation of immunoglobulin expression in mouse myeloma cells, Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 41, 781 (1977).

19. Kohler G., Howe S. C, Milstein C. Fusion between immunoglobulin secreting and non-secreting myeloma cell lines, Eur. J. Immunol., 6, 292 (1976).

20. Kohler G., Milstein CDerivation of specific antibody producing tissue culture and tuneor lines by cell fusion, Eur. J. Immunol., 6, 611 (1976).

21. Krause R. M. The search for antibodies with molecular uniformity, Adv. Immunol., 12, 1 (1970).

22. Haber E. Antibodies of restricted heterogeneity for structural study, Fed. Proc, 29, 66 (1970).

23. Scher A., Cohn M. Inheritance of an idiotype associated with the immune response of inbred mice to phosphorylcholine, Eur J. Immunol., 2, 319 (1972).

24. Cohn M. Natural history of the myeloma, Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 32, 211 (1967).

25. Paslay J. W., Roozen N. J. The effect of В cell stimulation on hybridoma formation. In: Monoclonal Antibodies and T Cell Hybridomas, ed. by G. J. Hammerling, U. Hammerling, and J. F. Kearney, p. 551, Elsevier/North-Holland Publishers, 1982.

26. Melchers F., Potter M., Warner N., eds. Current Topics in Microbiology and Immuno-biology, Vol. 81, Lymphocyte Hybridomas, Springer-Verlag, Berlin, 1978.

27. Kennett R. H., McKearn T. J., Bechtol K., eds. Monoclonal antibodies, Plenum Press, New York, 1980.

28. Hammerling G. J., Hammerling U., Kearney J. F., eds. Monoclonal Antibodies and T Cell Hybridomas, Elsevier/North-Holland, Amsterdam, 1981.

29. Hurrell J. G. R., ed. Monoclonal Hybridoma Antibodies: Techniques and applications, CRC Press, Boca Raton, Florida, 1982.

30. Engvall E., Pesce A. J. Quantitative enzyme immunoassay, Scand. J. Immunol., 8 (Suppl. 7), 23 (1978).

31. Maggro E. Т., ed. Enzyme Immunoassay, CRC Press, Boca Raton, Florida, 1980.

32. Baker R. M., Brunette D. M., Mankovitz R., Thompson L. H., Whitmore G. F., Simino-vitch L., Till J. E. Quabain-resistant mutants of mouse and hamster cells in culture, Cell, 1, 9 (1974).

33. Wright W. E., Hay flick L. Use of biochemical lesions for selection of human cells with hybrid cytoplasms, Proc Natl. Acad. Sci. USA, 72, 1812 (1975).

34. Burrows P. D., Beck G. В., Wabl M. R. Expression of p and у immunoglobulin heavy chains in different cells of a cloned mouse lymphoid line, Proc Natl. Acad. Sc

страница 87
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121

Скачать книгу "Иммунология. Том 3" (4.83Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(26.07.2017)