Биологический каталог




Иммунология. Том 3

Автор У.Пол

вляется детерминанта 34. Поскольку концевой сахар является иммунодоминантным, такие модификации, как отщепление ацетильной группы, изменения первой дисахаридной группы или присоединение еще одного сахара в любом случае будут приводить к изменению детерминанты О-антигена. Индуцируемые фагом биохимические изменения, по-видимому, обусловлены появлением гликозилтрансферазы, способной добавлять к имеющейся сахаридной цепи новый сахарный остаток. Этот фермент может кодироваться каким-либо фаговым или дерепрессированным эндогенным бактериальным геном.

23.5.2.2. Антигены группы крови

Основные групповые антигены крови А и В первоначально были обнаружены по способности сыворотки крови индивидов, у которых они отсутствуют, агглютинировать эритроциты, имеющие эти антигены (см. обзоры (33, 76—78]. Кроме того, у индивидов с группой крови 0 имеется антигенная детерминанта Н, не обнаруживаемая на эритроцитах А- или В-типов. Наконец, у индивидов всех трех групп могут быть и другие детерминанты, например Льюис-антигены (Le). И АВН- и Le-антигенные детерминанты входят в состав углеводных цепей. Эти углеводные цепи в свою очередь могут быть компонентами самых различных соединений, представленных на поверхности клетки, — гликолипидов (антигены АВ и Н) и глиопротеинов (Le-антигены). Первые из них синтезируются в клетках, тогда как вторые адсорбируются из сыворотки. В слизистых секретах, например в слюне, эти соединения представлены гликопротеинами. Молоко, кистозная жидкость яичников, слизистая желудка являются источниками растворимых олигосахаридов, содержащих групповые антигены крови. Данные антигены, к тому же, часто обнаруживаются и у других видов, в том числе примерно у половины бактерий кишечной флоры [76]. Столь широкая распространенность групповых антигенов крови человека может объяснять вездесущность активностей анти-АВ в сыворотке крови даже таких индивидов, которые никогда не подвергались воздействию этих антигенов при переливании крови или беременности.

Иммунохимическое изучение этих антигенов сильно упростилось после того, как выяснилось, что для данной цели можно использовать метод торможения гаптеном, если в качестве гаптена брать различные антигенные олигосахариды. Например, олигосахариды группы А будут тормозить агглютинацию эритроцитов группы А антителам анти-А. Кроме того, они будут подавлять проводимую с помощью тех же антител иммунопреципитацию гликопротеинов, несущих антигены группы А. Вследствие мономерности олигосахаридов их реакция с антителами будет приводить лишь к блокированию антигенсвязывающих участков антител, не вызывая образования преципитата.

Подавляющие иммунопреципитацию олигосахариды из кистозной жидкости яичников были выделены и изучены. В них найдены D-галактоза, L-фукоза, N-ацетил га лактоз амин и N-ацетилглюкозамин. Олигосахариды, обладающие наиболее выраженным тормозящим действием на каждый из антигенов, приведены на рис. 23.15. Видно, что и у АВН-, и у Le-антигенов последовательность корового олигосахарида одна и та же, а различия связаны лишь с са-харами, присоединенными к концу цепи или в точках ветвления. О наличии у различных детерминант общих свойств говорят не только данные, полученные с помощью метода торможения гаптеном, но и результаты других биохимических исследований. При ферментативном расщеплении антигенов А, В и Н образуется один и тот же коровый олигосахарид, который перекрестно

23. Взаимодействие антиген—антитело реагирует с антисывороткой, специфичной к пневмококковому полисахариду ипа XIV, и имеет с этим полисахаридом общие структурные элементы (рис. 3.15, внизу). Кроме того, предшественник групповых антигенов крови с точно акой же структурой был выделен из кистозной жидкости яичников.

Детерминанта Н образуется из предшественника путем присоединения L-фукозы к галактозе, детерминанта Lea — присоединением L-фукозы к N-ацетилглюкозамину, а детерминанта Leb — присоединением L-фукозы к каждому из двух Сахаров. При присоединении к Н N-ацетилгалактозамина получается детерминанта А, а при присоединении галактозы — детерминанта В. В обоих случаях специфичность, характерная для детерминанты Н, утрачивается.

Генетический контроль образования антигенов АВН и Le в рамках данной схемы последовательного присоединения Сахаров зависит от наличия соответствующей гликозилтрансферазы для каждой из реакций. Аллельный характер антигенов АВ объясняется присоединением к Н-антигену N-ацетилгалакто-замина или галактозы. При редко наследуемом признаке, заключающемся в неспособности синтезировать Н-детерминанту из вещества-предшественника (бомбейский фенотип), одновременно оказывается блокированным и образование антигенов А и В ввиду отсутствия необходимого субстрата для А- и В-трансфераз. В то же время появление на поверхности эритроцитов Льюис-антигенов (Lea) не зависит от наличия антигена Н. Структура Lea, изображенная на рис. 23.15, может быть получена прямо из предшественника, минуя промежуточную фазу, связанную с синтезом Н. Сравнительное изучение различных индивидов показывает, что появление антигена Lea на поверхности эритроцитов коррелирует с его присутствием в слюне, поскольку антиген Lea не является собственно компонентом мембраны, а адсорбируется на ней в составе сывороточных гликопротеинов, появление которых в свою очередь зависит от секреции. Помимо того что синтез Ьеа-антигена идет по независимому пути, его секреция также не связана с секрецией антигенов АВН. В результате у индивидов, в слюне которых нет антигенов АВН (они составляют 20% всех индивидов), антиген Lea может секретироваться, если в организме у них имеется фукозил-трансфераза, кодируемая геном Le. В то же время у индивидов, антигены АВН которых способны секретироваться в слюну, в результате воздействия Н-специфической фукозил-трансферазы на антиген Lea может образовываться антиген Leb, секретирующийся затем с помощью -секреторной системы АВН-антигенов. Поскольку антиген Lea в данном случае служит субстратом для дальнейших биохимических реакций, его секреция уменьшается настолько, что на поверхности эритроцитов индивидов, характеризующихся нормальной секрецией антигенов АВН, его обычно невозможно обнаружить, тогда как антиген Leb, наоборот, присутствует лишь у этих индивидов.

23.5.2.3. Декстрансвязывающие миеломные белки

Поскольку антигены полисахаридной природы распространены повсеместно, неудивительно, что среди случайно индуцированных миеломных имму- ¦ ноглобулинов часто обнаруживаются белки, специфичные по отношению к углеводам. Тщательное изучение этих моноклональных антител послужило доводом в пользу клональной модели разнообразия антител: в отношении аффинности и специфичности гетерогенные антисыворотки ведут себя как сумма многих индивидуальных клонов антител. Было показано, что два миеломных белка W3129 и W3434, принадлежащих классу IgAx, оказались специфичными к декстранам, имеющим в своем составе связи a-Glu (1 —*¦&) [60]. Эксперименты чо торможению преципитации с помощью различных моно-, ди-и олигосахаридов возрастающей длины показали, что энергия связывания белка с одной молекулой глюкозы составляет 75%, с двумя — 95%, с тремя — 95—98%, а с четырьмя — 100% максимальной энергии взаимодействия белка с олигосахаридом. Эти результаты показывают, что наибольший вклад в энергию взаимодействия декстрана со специфичным к нему антителом вносит концевой сахар декстрана и что олигосахариды с длиной цепи 4—6 остатков обычно заполняют весь антигенсвязывающий центр антитела. Человеческие антидекстрановые антитела ведут себя аналогичным образом. Энергия их связывания с тетрасахаридами составляет 95% максимальной энергии связывания. На основе этих экспериментов впервые было получено приближенное значение размера антигенной детерминанты, равное 4—6 остаткам [79, 80].

23. Взаимодействие антиген—антитело И миеломные белки, и антисыворотки обладают высокой специфичностью по отношению к гликозидной ос (1 -*¦ 6)-связи концевого сахара в сравнении с а (1 -»-3)-связью, а их аффинность к декстрану оказывается весьма чувствительной к модификациям концевого сахара. В то же время модификации третьего или четвертого сахара олнгосахарида сравнительно мало влияют на способность гаптена тормозить преципитацию декстраиа реагирующими с ним миеломными белками и сывороточными антителами.

В исследованиях, выполненных на других декстрансвязывающих миеломных белках [81], было обнаружено, что не все антиполисахаридные моноклональные антитела специфичны именно к невосстанавливающему концу олигосахарида. Таким свойством не обладают, например, антитела QUPC52. Эксперименты по конкурентному торможению моно- и олигосахаридами связывания этих антител с декстранами показали, что энергия взаимодействия моно- и дисахарида с антителом составляет менее 5%, энергия связывания трисахарида — 72%, тетрасахарида — 88%, гексасахарида — 100%. Эти результаты отличны от данных, полученных с другими миеломными белками. Второе отличительное свойство миеломного белка QUPC52 заключается в его способности осаждать неразветвленный декстран длиной в 200 остатков. Поскольку у неразветвленного декстраиа имеется лишь один невосстанавливаю-щий конец цепи и поскольку белок QUPC52 является моноспецифичным, то связывание данного белка с невосстанавливающими концами молекул такого декстраиа не должно приводить к образованию преципитационной решетки. Поэтому наблюдаемую в этом случае преципитацию можно объяснить лишь тем, что белок QUPC52 связывается с какой-либо другой детерминантой, представляющей собой, по-видимому, неконцевой олигосахаридный фрагмент длиной 3—7 остатков. В отличие от QUPC52 белок W3129 специфичен именно к концевой детерминанте и, естественно, не способен осаждать неразветвлен-ные декстрановые цепи. Антитела, осаждающие линейные цепи декстраиа, обнаружены также в шести человеческих антидекстрановых сыворотках, составляя в них от 48 до 90% всех антител, специфичных к разветвленным декстра-новым цепям. Таким образом, антидекстрановые антитела можно разделить на специфичные к концевым и к внутрицепочечным олигссахаридам.

страница 15
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121

Скачать книгу "Иммунология. Том 3" (4.83Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(25.11.2017)