Биологический каталог




Иммунология. Том 3

Автор У.Пол

ми данными вопрос о возможной экспрессии одним Т-клеточным клоном двух независимых рецепторов, один из которых распознает «обычный» антиген, а другой — аллоантиген. Отличное от случайного распределение аллореактивности среди Т-клеточных клонов, отмечавшееся этими исследователями, свидетельствует о связи антигенной специфичности и аллоантигенной специфичности. Однако это еще не значит, что у Т-лимфоцита имеется лишь один рецептор, и пока не будут проведены молекулярно-генетические исследования Т-клеточных рецепторов, специфичных к антигену и к аллоантигену, проблема останется нерешенной.

Описаны и другие примеры двойного антигенного распознавания клонами ЦТЛ. Например, 1) распознавание антигена H-Y и аллоантигена [105], 2) антигена, ассоциированного с вирусом лейкемии Молони, и аллоантигена [107, 108], 3) антигена вируса гриппа А и аллоантигена [109, 110]. ЦТЛ, отвечающие на модифицированные гаптеном сингенные клетки, также могут обладать разными видами перекрестной реактивности [38].

В совокупности эти результаты свидетельствуют о большей гетерогенности распознавания антигенов цитотоксическими и пролиферирующими антиген-реактивными Т-лимфоцитами, чем это следует из данных, полученных в обычных системах анализа. Ответ Т-клеток более чем на одну антигенную детерминанту встречается настолько часто, что его следует считать правилом, а не исключением.

Оказалось, что цитолитические клоны можно также использовать для выяснения функциональной роли определенных поверхностных молекул клеток. Было показано, что все клонированные ЦТЛ, взаимодействующие со специфическими клетками-мишенями, несут молекулы Lyt-2. Обычно литическая активность клонированных ЦТЛ подавляется антителами к Lyt-2 [111], однако в уровне угнетения разных клонов наблюдаются различия. Клоны клеток, по-

30.

Длительные культуры

иммунокомпетентных клеток лученные после иммунизации in vivo, менее подвержены угнетению [112]. Для определения функции поверхностных молекул вариантные клоны ЦТЛ оказались также полезны [113]. Так, вариантные клетки клона, утратившие Lyt-2, теряли цитолитическую активность по отношению к специфическим клеткам-мишеням, но сохраняли активность в системе цитолиза, опосредованного лек-тином [113]. Эти наблюдения свидетельствуют о том, что Lyt-2-поверхностный антиген, по-видимому, участвует в связывании эффекторного ЦТЛ с клеткой-мишенью, но не вовлечен прямо в литическую активность.

Эти данные в сочетании с наблюдениями о том, что молекулы Lyt-2, выделенные из клонов ЦТЛ, обладают одинаковой подвижностью при анализе методом двумерного электрофореза (М. Sarmiento, личное сообщение), указывают на то, что, по всей вероятности, молекула Lyt-2 не является Т-клеточным рецептором к антигену.

Хотя большинство цитотоксических Т-лимфоцитов нуждается для роста в IL-2 и не пролиферирует в культуре в ответ на специфический аллоантиген, небольшая часть ЦТЛ представляет исключение из этого правила. Некоторые ЦТЛ способны пролиферировать при культивировании в присутствии стимулирующего аллоантигена [114, 115] и секретировать определенное количество IL-2. Клональная природа по меньшей мере части этих ЦТЛ доказана, поскольку они были получены в серии последовательных клонирований с помощью микроманипулятора [69]. Такие клоны относительно редки (менее 10% от всех клонов ЦТЛ); с большей частотой они встречаются среди Т-клеток, реагирующих на аллоантигены областей К и D.

Второй важной областью применения Т-клеточных клонов являются исследования механизмов Т-клеточной активации. Если принять несколько условное определение генов Ir, как генетически обусловленной способности иммунных Т-лимфоцитов отвечать на антиген, то очевидно, что именно Т-клетки доказывают, что молекулы 1а являются продуктами генов Ir [116]. В основу этих исследований легло использование Т-клеточных клонов, пролиферирующих в ответ на обычный антиген. Такие клоны распознают антиген в сочетании с продуктами области / [116, 117]. Генетические исследования показали, что продукты генов Ir во всевозможных комбинациях могут служить рестрикти-рующими элементами при презентации антигена антиген-специфическим Т-клеточным клонам, полученным от животных Fx. При этом могут распознаваться не только комбинации различных продуктов области I-A, но рестриктирующие молекулы могут формироваться и в результате комбинаторной ассоциации а-цепи (Еа), кодируемой в субобласти 1-Е, и [J-цепи (Ер), кодируемой в субобласти I-A МНС [118]. Взаимосвязь молекул I-A и антиген-реактивных Т-лимфоцитов сама по себе не доказывает того, что молекулы I-A представляют собой продукты генов Ir.

В двух разных направлениях исследований были получены более веские доводы в пользу не только ассоциации, но и идентичности этих двух структур. Первым таким направлением является исследование с использованием моноклональных анти-1 а-антител, эффективно блокирующих способность определенных антиген-реактивных Т-клеточных клонов отвечать на соответствующие антигены [119, 120]. Это подавление строго специфично. Антиген-презентирую-щая клетка (АПК) Fj экспрессирует на своей поверхности набор молекул 1а. Используя моноклональные анти-1 а-антитела, можно избирательно блокировать данную молекулу 1а и выявить Т-клеточный клон, который использует для сочетанного распознавания антигена именно эту молекулу 1а. С помощью моноклональных анти-1 а-антител можно специфически отменять ответ ряда клонов, распознающих одну и ту же молекулу 1а на поверхности АПК, не влияя С. Г. Фэтмеп, ф, В. Фитч

при этом на способность тех же АПК презентировать тот же самый антиген другим Т-клеточным клонам, рестриктирующим элементом которых служит другая молекула 1а [119]. Вторая группа данных, поддерживающих гипотезу об идентичности молекул 1а и продуктов генов /г, получена в исследованиях с использованием мутантной линии мышей B6.C-Hbm12 (bm.12). Мыши этой линии, которая впервые была выведена в лаборатории Роджера Мелволда, несут мутацию 6-цепи продукта гена 1-Аъ [121]. Исследования на гибридах Fb полученных при скрещивании мышей линии А и мутантов bml2, убедительно показали, что молекула 1а является продуктом гена /г [116]. Эти выводы недавно были подтверждены и дополнены результатами сравнительного анализа ответа мутантов Ьгд12 и мышей дикого типа В6 на некоторые антигены. Данные работы отчетливо показали, что у мышей bml2 часть иммунореактивности, свойственной родительской линии В6, сохраняется, а часть утрачивается. По сути дела мыши приобретают новый спектр иммунореактивности г.

Использование Т-клеточных клонов привело к значительным успехам и в изучении взаимодействий Т-лимфоцитов с другими иммунокомпетентными клетками, позволив исследователям анализировать передачу сигнала между отдельными клетками, а не среди клеток. Эти исследования однозначно показали необходимость ряда лимфокинов для запуска пролиферации и последующих взаимодействий иммунокомпетентных клеток. Т-клеточные клоны стали основным источником для выделения и изучения антиген-специфических факторов. Исследования Кантора и сотр. [40, 70] убедительно продемонстрировали, что мышиные Т-клеточные клоны с супрессорным фенотипом экспрессируют и либо секретируют, либо сбрасывают антиген-специфический супрессорный фактор. Начальные исследования антиген-специфических супрессорных продуктов, образуемых такими Т-клеточными клонами, оказались весьма информативными и указали на существование нескольких разных типов супрессорных антиген-специфических факторов.

В недавней работе Сингера и др. было установлено, что один и тот же хелперный Т-клеточный клон способен двумя независимыми способами «помогать» созреванию В-клеток в антителообразующие клетки [64]. Вкратце эти исследования показали, что Т-клеточный клон, отвечающий на гемоцианин в присутствии высоких концентраций динитрофенил(ДНФ)-гемоцианина, преимущественно индуцирует анти-ДНФ-IgM-oTBeT В-лимфоцитов Lyb-5+. Для антительного ответа этой субпопуляции В-лимфоцитов необходимо совпадение по району I между Т-лимфоцитом и антиген-презентирующей клеткой, но не требуется ни совпадения по МНС между Т- и В-лимфоцитом, ни наличия ковалентной связи между гаптеном, ДНФ и гемоцианином. Тот же самый Т-клеточный клон при стимуляции низкими дозами конъюгата ДНФ-гемоцианина индуцирует дифференцировку стимулированных гаптеном В-лимфоцитов Lyb-5~ в IgG-сек-ретирующие клетки. Этот ответ рестриктирован по МНС на уровне Т-В-клеточ-ного взаимодействия, и в этом случае необходима ковалентная связь гаптена ДНФ с носителем, гемоцианином.

И наконец, во многих лабораториях, в которых используются Т-клоны, исследуется Т-клеточный рецептор к антигену. Современные данные указывают на то, что аллореактивные мышиные Т-клеточные клоны несут уникальные идио-типические поверхностные структуры [122, 123]. Хотя пока неясно, имеют ли эти идиотипические структуры отношение к Т-клеточному рецептору, очевидно, что сейчас уже существует методический подход к выделению и характеристике

1 Более подробно об этих работах см. гл. 16. — Прим. перев.

30. Длительные культуры иммунокомпетентных клеток клонотипических поверхностных структур мышиных Т-лимфоцитов 1. Одним из главных достижений молекулярной генетики является выделение и характеристика антиген-специфического Т-клеточного рецептора. Возможно, что к моменту выхода в свет следующего издания этой книги можно будет написать исчерпывающий раздел, посвященный молекулярной генетике антиген-специфического рецептора Т-лимфоцитов. Очевидно, что в настоящее время у нас нет ясного представления даже о числе рецепторов на одну Т-клетку, не говоря уже о молекулярных характеристиках этих структур 2.

ЛИТЕРАТУРА

1. Gillis S., Scheid М., Watson J. The biochemical and biological characterization of lymphocyte regulatory molecules. III. The isolation and phenotypic characterization of Interleukin 2 producing T cell lymphomas, J. Immunol., 125, 2570 (1980).

2. Farrar J. J., Fuller-Farrar J., Simon P. L., Hilfiker M. L., Stadler В. M., Farrar W. L. Thymoma production of T cell growth factor (Inter

страница 101
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121

Скачать книгу "Иммунология. Том 3" (4.83Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(24.11.2017)