Биологический каталог




Механизмы внутриклеточной сигнализации

Автор З.И.Крутецкая, О.Е.Лебедев, Л.С.Курилова

). Показано также, что слабые электромагнитные поля увеличивают вход Са"т в клетки и приводят к лейкемии (Putney. 1997). В связи с этим становится понятной необходимость жесткой регуляции входа Са"" в клетки. Ингибиторы депо-зависимого входа Са"' могут использоваться в клинической практике. В настоящее время ингибиторы депо-зависимого входа Са"+ используются в основном для лечения воспалительных процессов и лечения рака. Так, тенидап (ингибитор циклооксигеназ), блокирующий емкостной вход Са"\ используется в клинике для лечения ревматоидного артрита. Клотримазол (антимикотический агент, блокирующий эпоксигеназы или цитохром Р-450-подобные ферменты), также ингибирующий депо-зависимый вход Са2+, используется для лечения рака (Putney, 1997, 2001).

5.4. Механизмы Са2+-сигнализации в перитонеальных макрофагах

Фагоцитирующие клетки (макрофаги, нейтрофилы) отвечают на воздействие разнообразных агонистов, быстро гидролизуя мембранные фосфолипиды, что приводит к генерации большого числа внутриклеточных и экстраклеточных мессенджеров. Одним из наиболее ранних событий, запускаемых в этих клетках при воспалительных реакциях, является активация сигнальных путей с участием фосфоинозитид-специфической фосфолипазы С и фосфолипазы А2, что играет ключевую роль в запуске или модуляции хемотаксиса, секреции, фагоцитоза, образования супероксидов (Snyderman, L'hing, 1992).

В связи с этим, нам представлялось целесообразным с использованием флуоресцентного Са~+-зонда Fura-2 AM исследовать механизмы генерации и регуляции Са"*-сигналов и в первую очередь входа Са2+ в таком удобном объекте как перитонеальные макрофаги при их активации пуринергическими агонистами (АТФ, УТФ) и ингибиторами эндоплазматических Са2+-АТФаз (тапсигаргин, циклопьязониковая кислота (ЦПК)). Связывание АТФ или УТФ с пуринорецепторами типа Р2и приводит к активации фосфоинозитидного цикла и вызывает двухфазное увеличение внутриклеточной концентрации Са"+, [Са**],, в макрофагах. В качестве первой фазы выступает кратковременная мобилизация Са-1 из внутриклеточных депо. Вторая фаза, более длительная, связана с входом Са"* из наружной среды, обусловленным, по-видимому, опустошением депо. Экзогенная АТФ может также активировать лиганд-управляемые Са~+-каналы пуринорецепторов Р-типа. Специфические ингибиторы эндоплазматических Са~*-АТФаз тапсигаргин или ЦПК также вызывают двухфазный Са"+-сигнал: достаточно быстрый пик, связанный с мобилизацией Са"* из депо, и длительную фазу, отражающую депо-зависимый вход Са"* из наружной среды (Крутецкая и др., 2000).

Выявлены фармакологические характеристики депо-зависимого входа Са"* в перитонеальные макрофаги. Показано, что депо-зависимый вход Са"', индуцированный тапсигаргином или УТФ, подавляется следующими фармакологическими агентами: двумя структурно различными ингибиторами потенциал-зависимых Са""-каналов нифедипином и верапамилом: неорганическими блокаторами: ионами Ni" , La3*, Gd3*; блокатором неселективных катионных каналов нифлумовой кислотой. Полученные данные свидетельствуют о том, что депо-зависимые Са2+-каналы в перитонеальных макрофагах крысы по фармакологическим характеристикам сходны с Са""-каналами L-типа. Подобно trp-каналам Drosophila они могут напоминать Са~~-каналы L-типа, не имеющие сенсора напряжения (Крутецкая и др, 1997 в).

Вход Са"* в перитонеальные макрофаги регулируется тирозинкиназами и тирозинфосфатазами. Впервые установлено, что два структурно различных ингибитора тирозинкиназ генистейн и метил-2,5-дигидроксициннамат ингибируют вход Са*, индуцируемый АТФ, УТФ, тапсигаргином или ЦПК. Фаза мобилизации Са"* из депо остается без изменения. Генистин, структурный аналог генистейна, не способный ингибировать тирозинкиназы, не влияет на параметры Са'*-сигНалов, вызываемых пуринергическими агонистами и ингибиторами Са"*-АТФаз. Ингибитор тирозинфосфатаз ортованадат Na увеличивает вход Са"+, индуцируемый этими агентами, но не предотвращает ингибирующее действие генистейна (Крутецкая и др, 1997 а). Ингибиторы тирозинфосфатаз фениларзиноксид, Н2СЬ, N-этилмалеимид вызывают дозо-зависимое увеличение [Са~']„ которое связано как с мобилизацией Са2+ из внутриклеточных депо, так и с активацией входа Са~+ из наружной среды. В регуляции вызываемых ингибиторами тирозинфосфатаз Са"+-ответов участвуют тирозинкиназы, продукты циклооксигеназного и липоксигеназного путей окисления арахидоновой кислоты, а также такие элементы цитоскелета как микротрубочки и актиновые микрофиламенты. Полученные данные позволяют сделать вывод, что динамический баланс между активностью тирозинкиназ и тирозинфосфатаз может играть центральную роль в поддержании внутриклеточного Са"+ гомеостаза как в покоящихся клетках, так и при действии агонистов (Крутецкая и др, 1997 б).

В процессах функциональной активации макрофагов важную роль играют арахидоновая кислота (АК) и продукты ее метаболизма. Вход Са"' в макрофаги, индуцированный пуринергическими агонистами или ингибиторами эндоплазматических Са"*-АТФаз. подавляется ингибитором фосфолипазы А2 4-бромфенацилбромидом, ингибиторами циклооксигеназ (индометацин, аспирин) и ингибиторами липоксигеназ (нордигидрогуаретиковая кислота, байкалейн, каффеиковая кислота). Это позволяет предположить, что метаболиты циклооксигеназного и липоксигеназного пути окисления АК могут участвовать в регуляции входа Са-* в перитонеальные макрофаги. Ингибиторы эпоксигеназ эконазол и проадифен оказывают множественное влияние на процессы Са"*-снгнапизации в макрофагах. Кроме ингибирования входа Са"", эти имидазольные соединения в более высоких концентрациях индуцируют также мобилизацию Са~* из тапсигаргин-чувствительных Са"-депо. Анализ наших результатов, а также последних литературных данных позволяет предположить. что эконазол и проадифен могут

ISO

непосредственно блокировать каналы входа Са'т (Крутецкая и др.. 1998 в).

АК и другие свободные жирные кислоты оказывают множественное влияние на процессы Са2+-сигнализации в перитонеальных макрофагах крысы. Цис-поли

страница 52
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77

Скачать книгу "Механизмы внутриклеточной сигнализации" (3.04Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(16.06.2019)