Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 3

Автор Ф.Герхардт

беспечивая поступление воздуха в гибкий шланг, разрезают полиэтиленовую пленку, закрывающую окно, и включают вентилятор бокса. Бокс вентилируют в течение нескольких часов, чтобы удалить все следы формальдегида.

Проливание потенциально опасного биологического-материала в лаборатории вне биологически безопасного» бокса может подвергнуть риску тех, кто там находится. Если это произошло, прежде всего надо избежать вдыхания любого материала, находящегося в воздухе, для чего задерживают дыхание и покидают лабораторию. Те, кто находился в помещении, предупреждают остальных об опасности и идут под душ или в раздевалку. Когда известно или есть подозрение, что заражена одежда, ее осторожно снимают, складывая зараженными местами внутрь, а затем кладут в мешок или загружают непосредственно в автоклав. Моют предположительно подвергшиеся заражению места, а также руки и лицо. Не заходят вновь в лабораторию в течение 30 мин, чтобы дать возможность осесть образовавшимся при проливании капелькам аэрозоля. Перед тем как войти в лабораторию, чтобы вымыть место, где была пролита суспензия, надевают защитную одежду (резиновые перчатки, обувь, которую можно автоклавиро-вать, накидку и респиратор). Если суспензия была пролита на пол, не рекомендуется надевать хирургический халат, который может соприкасаться с полом при нагибании. Рядом с местом, где пролили суспензию, ставят контейнер для отходов, переносят туда крупные куски зараженного материала и закрывают его крышкой. Место, где виден пролитый материал, и вокруг него осторожно поливают раствором гипохлорита, содержащим 1000 ч. на млн. доступного хлора, раствором иодо-фора, содержащим 1600 ч. на млн. иода или другим подходящим дезинфицирующим агентом. Обработку производят в течение 15 мин, избегая брызг. Затем бумажным или матерчатым полотенцем вытирают дезинфицирующий раствор и пролитый материал по направлению к центру. Грязные полотенца сразу же бросают в контейнер для отходов. Контейнер для отходов, особенно дно, протирают снаружи полотенцем, смоченным в дезинфицирующем растворе, и помещают его и другие материалы в автоклав для стерилизации. Снимают обувь, верхнюю накидку, респиратор и перчатки и стерилизуют их в автоклаве. Моют руки и лицо и, если можно, принимают душ.

24.4.5. Инструменты

Зараженные шприцы, инструменты, термометры, пипетки и стеклянная посуда перед новым использованием должны быть обеззаражены. Если возможно, конечную обработку следует проводить паром для жаропрочных предметов или окисью этилена для неустойчивых к нагреванию и чувствительных к влаге материалов. В тех случаях, когда перед употреблением необходимо обеззараживание, для дезинфекции используют раствор 2%-ного глутарового альдегида. Предметы полностью погружают в раствор на 20—30 мин. При этом полная безопасность не гарантируется, если предмет не был предварительно вымыт или если раствор уже использовали ранее. Перед повторным употреблением инструменты необходимо тщательно прополоскать в дистиллированной воде, а если они предназначены для работы в полости тела животного или на его поверхности, то в стерильной дистиллированной воде.

Лабораторные пипетки обеззараживают погружением в дезинфицирующий раствор, например 2%-ный о-фенилфенол, налитый в вертикальную или горизонтальную емкость Стеклянную посуду погружают полностью Перед использованием стеклянную посуду стерилизуют паром.

24.4.6. Руки

Для обычного мытья рук в лаборатории, когда не имеют дела с инфекционными агентами, можно применять разные моющие средства. Тщательное мытье рук в течение 15—20 с с вескодином приводит к сокращению числа бактерий более чем на 50%.

Мыло в кусках использовать не рекомендуется не только из-за грязи в мыльнице, но также потому, что некоторые микроорганизмы сохраняют жизнеспособность на мыле в течение некоторого времени. Если в резервуар с жидким мылом не добавлять предохраняющих средств, то там могут постепенно вырасти многочисленные популяции бактерий. В этом случае резервуар следует вымыть обычным способом и налить туда новое мыло Порошковые и листовые мыла имеют то преимущество, что они не загрязняются бактериями и бактерии не способны расти на них

Быструю дезинфекцию рук после загрязнения производят одним из следующих способов: 1) моют руки щеткой 30—60 с смесью вескодина и детергента и ополаскивают их водой; 2) моют руки щеткой 30—60 с смесью 4%-ного хлоргексидина и детергента и ополаскивают водой; 3) моют руки 20—30 с смесью фенольно-го дезинфектанта и детергента и затем ополаскивают водой (некоторые фенольные производные при слишком частом использовании в слишком больших концентрациях могут вызвать депигментацию смуглой кожи), 4) смачивают руки спиртом (50—70%) на 20—30 с, затем моют их щеткой с мылом в течение 10—15 с и ополаскивают водой

Благодарности

Я благодарю участников Специального комитета по безопасности и охране здоровья, которые подготовили книгу под названием «Монография по лабораторной безопасности— дополнения к указаниям Национального института здоровья для исследований рекомбинантной ДНК», вышедшую в июле 1978 г Информация, представленная в этой главе, в основном опирается на материалы этой монографии

24.5. ЛИТЕРАТУРА

24.5.1. Общая литература

1 Chattgny М A Protection against infection in the microbiological laboratory Devices and procedures Adv Appl Microbiol, 3, 131 — 192 (1961)

2 Collins С H, Hartley E G, Pillswoiih R The prevention of labo ratory acquucd infections Public Health Laboiatorv Service Mo nograph Series No 6 Her Majesty's Stationaiy Office, London (1974)

3 Darlow H M Safety in the microbiological laboratory, p 169— 204 In Noiris J R and Ribbons R W (ed), Methods in microbiology Academic Press, Inc, New York (1969)

4 Phillips G В Microbiological hazards in the laboratory 1 Con trol, II Prevention J Chem Educ, 42, A43—A48, 42, AI17— A130 (1965)

5 Phillips G В Control of microbiological hazards in the laboratory Am Ind Hyg Assoc J , 30, 170—176 (1969)

6 Songer J R, Sullivan J F Safety in the biological laboratory J Chem Educ ,51 A481— A485 (1974)

7 Wedum A G Biohazard control p 191-210 In Mtlby E С Jr and Altman N H (ed), Handbook of laboratory animal science, vol 1, CRC Press, Inc, Cleveland (1974)

24.5.2. Справочники и руководства по безопасности

8 U S Public Health Service Classification of etiologic agents on the basis of hazard, 4th ed, p I —13 Center for Disease Control Atlanta, Ga (1976)

9 U S Public Health Service Laboiatory safety at the Center foi Disease Control Depaitment of Health Education and Welfare, Publication No CDC 77—8118 Center for Disease Control, Atlan ta Ga (1977)

10 U S Public Health Service NIH biohazard safety guide GPO

Stock No 1740—00383 U S Government Printing Office, Washington, D С (1974)

24.5.3. Лабораторные инфекции

11 Pike R M Laboratory associated infections summary and analysis of 3921 cases Health Lab Sci, 13 (2), 105—114 (1976)

12 Pike R M, Sulkm S E, Shulze M L Continuing importance of laboratory acquired infections Am J Public Health, 55, 190—199 (1965)

24.5.4. Специфические лабораторные действия

13. Grieff D. Safe procedure for opening evacuated glass ampoules containing dried pathogens. Appl. Microbiol., 18, 130 (1969).

14. Harvey R. W. S„ Price Т. H., Joynson D. H. M. Observations on environmental contamination in a microbiological laboratory. J. Hyg., 76, 91—96 (1976).

15. Hellman A., Oxman M. N.± Pollack R. (ed.). Biohazards in biological research. In Proceedings of Conference held at Asilomar Conference Center, Pacific Grove, Calif., 22—24 January. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N. Y. (1973).

16. Morris C. A., Everall P. H. Safe disposal of air discharged from centrifuges. J. Clin. Pathol., 25, 742 (1972).

17. Phillips G. В., Jemski J. V. Biological safety in the animal laboratory. Lab. Anim, Care, 13, 13—20 (1963).

18. Reilman M., Wedum A. G. Microbiological safety. Public Health Rep., 71, 659-665 (1956).

24.5.5. Дезинфекция

19. Block S. S. Disinfection, sterilization and preservation, 2nd ed. Lea and Febiger, Philadelphia (1977).

20. Sykes G. Disinfection and sterilization, 2nd ed. J. B. Lippincott Co., Philadelphia (1967).

Часть VII ПРИЛОЖЕНИЕ

Глава 25

РАСТВОРЫ ДЛЯ РАЗВЕДЕНИЯ И ИЗМЕРЕНИЕ БИОМАССЫ

Ф. Герхардт

В этом приложении описывается ряд важных методов, применяемых в экспериментах, описанных в предыдущих главах.

25.1. РАСТВОРЫ ДЛЯ РАЗВЕДЕНИЯ

Иногда при микроскопировании, измерении числа клеток, изучении генетических и метаболических свойств, а также для предварительной отмывки густые суспензии бактерий требуется довольно сильно разводить. При этом важно, чтобы клетки сохраняли свои исходные характеристики, особенно жизнеспособность и уровень обменных процессов. В разведенных суспензиях клетки легче подвергаются вредным воздействиям со стороны неблагоприятной для них среды, чем в концентрированных суспензиях, для которых характерно высокое содержание в среде веществ, поступивших туда из клеток. В связи с этим состав раствора для разведения следует предварительно подобрать.

В качестве такого раствора, как правило, нельзя использовать дистиллированную или водопроводную воду, поскольку она гипотонична по отношению ко всем (за исключением покоящихся спор) бактериальным клеткам и не обладает буферными свойствами. Физиологический раствор (0,85%-ный NaCl) обычно также не подходит для разведения, поскольку он не забуферен и изотони-чеи только по отношению к клеткам млекопитающих. По тем же причинам не годится обычно и фосфатный буфер. При разведении такими растворами жизнеспособность клеток может упасть на 50% или более.

Как правило, в качестве раствора для разведения применяют фосфатно-солевой буфер с желатиной. Присутствис белка стабилизирует чувствительные к механическим повреждениям бактерии и фаги, а фосфат благодаря своим буферным свойствам способствует сохранению рН около 7,0. В состав фосфатно-солевого буфера входит 8,5 г NaCI, 0,3 г безводного КН2РО4, 0,6 г безводного Na2HP04, 0,1

страница 38
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 3" (2.64Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(26.06.2022)