Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 1

Автор Ф.Герхардт

. Physiological basis of the selective advantage of a Spirillum sp. in a carbon-limited environment, J. Gen. Microbiol., 105, 187—197 (1978).

50. Meiklejohn J. The isolation of Nitrosomonas europaea in pure culture, J. Gen. Microbiol., 4, 185—191 (1950).

51. Meynell G. G., Meynetl E. Theory and practice in experimental bacteriology, Cambridge University Press, London, 1965. [Имеется перевод: Мейнелл Дж., Мейнелл Э. Экспериментальная микробиология (Теория и "практика). — М.: Мир, 1967.]

52. Morita R. Y. Psychrophilic bacteria, Bacteriol. Rev., 39, 144—167 (1975).

53. Myrvik Q. N., Pear sail N. N., Weiser R. S. Fundamentals of medical bacteriology and mycology, Lea and Febiger, Philadelphia, 1974.

54. Nunley J. W.t Krieg N. R. Isolation of Gallionelta ferruginea by use of formalin, Can. J. Microbiol., 14, 385—389 (1968).

55. Peterson J. E. Isolation, cultivation and maintenance of the myxo-bacteria, p. 185—210. In: J. R. Norris and D. W. Ribbons (eds.), Methods in microbiology, vol. 3B, Academic Press, Inc., New York, 1969.

56. Pfennig N., Biebl tf. Desulfuromonas acetoxidans gen. nov .and sp. nov., a new anaerobic, sulfur-reducing, scetate-oxidizing bacterium, Arch. Microbiol., 110, 3—12 (1976).

57. Poindexter J. S. Biological properties and classification of the Caulobacter group, Bacteriol. Rev., 28, 231—295 (1964).

58. Pramer D. A., Schmidt E. L. Experimental soil microbiology, Burgess Publishing Co., Minneapolis, 1964.

59. Rippka R., Deruelles J., Waterbury J. В., Herdman M., Stanier R. Y. Generic assignments, strain histories and properties of pure cultures of cyanobacteria, J. Gen. Microbiol., Ill, 1—61 (1979).

60. Rittenberg В. Т., Rittenberg S. C. The growth of Spirillum volutans in mixed and pure cultures, Arch. Mikrobiol., 42, 138—153 (1962).

61. Rosebury T. Microorganisms indigenous to man, McGraw-Hill Book Co., New York, 1962.

62. Rosebury Т., Foley G. Isolation and pure cultivation of the smaller mouth spirochaetes by an improved method, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 47, 368—374 (1942).

63. Rosebury Т., McDonald J. В., Ellison S. A., Engel S. G. Media and methods for separation and cultivation of oral spirochaetes, Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol., 4, 68—85 (1951).

64. Scotten tf. L., Stokes J. L. Isolation and properties of Beggiatoa, Arch. Mikrobiol., 42, 353—368 (1962).

65. Sehgal 5. N„ Gibbons N. E. Effect of some metal ions on the growth of Halobacterium cutrirubrum, Can. J. Microbiol., 6, 165— 169 (1960).

66. Singh B. Myxobacteria in soils and composts: their distribution, number and lytic action on bacteria, J. Gen. Microbiol., 1, 1—10 (1947).

67. Stack J. M.f Snyder L S. Bacteria and human disease, Year Book Medical Publishers, Chicago, 1978.

68. Smibert R. M. Vibrio fetus var. intestinalis isolated from fecal and intestinal contents of clinically normal sheep: isolation of microaerophilic vibrios, Am. J. Vet. Res., 26, 315—319 (1965).

69. Smibert R, M. Vibrio fetus var. intestinalis isolated from the intestinal contents of birds, Am. J. Vet. Res., 30, 1437—1442 (1969).

70. Smibert R. M., Claterbaugh R. L., Jr. A chemically-defined medium for Treponema strain PR-7 isolated from the intestine of a pig with swine dysentery, Can. X Microbiol., 18, 1073—1078 (1972).

71. Smith L. D., Dowell V. R. Clostridium, p. 376—380. In: E. H. Len-nette, E. H. Spaulding and J. P. Truant (eds.), Manual of clinical microbiology, 2nd ed., American Society for Microbiology, Washington, D. C, 1974.

72. Stanier R. Y. The Cytophaga group: a contribution to the biology of myxobacteria, Bacteriol. Rev., 6, 143—196 (1942).

73. Stanier R. Y„ Kunisawa R., Mandel M.t Cohen-Bazlre G. Purification and properties of unicellular blue-green algae (order Chroococ-cales), Bacteriol. Rev., 35, 171—205 (1971).

74. Stanier R. Y., Palleroni N. L, Doudoroff M. The aerobic pseudomo-nads: a taxonomic study, J. Gen. Microbiol., 43, 159—271 (1966).

75. Stolp H„ Starr M. P. Bdeltovibrio bacteriovorus gen. et sp. п., a predatory, ectoparasitic and bacteriolytic microorganism. Antonie van Leeuwenhoek, J. Microbiol. Serol., 29, 217—248 (1963).

76. Van Ntel С. B, Techniques for the enrichment, isolation and maintenance of the photosynthetic bacteria, Methods Enzymol., 23, 3—28 (1971).

77. Veldkamp H. A study of two marine agardecomposing, facultatively anaerobic myxobacteria, J. Gen. Microbiol., 26, 331—342 (1961).

78. Vishniac W., Santer M. The thiobacilli, Bacteriol. Rev., 21, 195— 213 (1957).

79. Warke G. M., Dhata S. A. Use of inhibitors for selective isolation and enumeration of Cytophagas from natural substrates, J. Gen. Microbiol., 51, 43—48 (1968).

80. Waterbury J. В., Stanier R. Y. Patterns of growth and development in pleurocapsalean cyanobacteria, Microbiol. Rev., 42, 2—44 (1978).

81. Widdel F., Pfennig N. A new naerobic, sporing, acetate-oxidizing sulfate-reducing bacterium, Desulfotomaculum (emend.) acetoxidans, Arch. Microbiol., 112, 119—122 (1977).

82. Wiley W. R., Stokes J. L. Requirement of an alkaline pH and ammonia for substrate oxidation by Bacillus pasteurii, J. Bacteriol., 84, 730—734 (1962).

83. Williams M. A., Rittenberg S. C. A taxonomic study of the genus Spirillum Ehrenberg, Int. Bull. Bacteriol. Nomencl. Taxon., 7, 49— 111 (1957).

84. Wilson G. S., Miles A. A. Topley and Wilson's principles of bacteriology and immunity, 5th ed. The Williams and Wilkins Co, Baltimore, 1964.

Глава 9

ТВЕРДАЯ КУЛЬТУРА Я. Криг, Ф. Герхардт

Среды в твердом состоянии в форме плотных гелей используются в бактериологии с времен Роберта Коха. Наиболее важным преимуществом использования твердых сред является то, что на них можно выращивать микроорганизмы в виде колоний, образующихся из отдельных клеток популяции. Поэтому посев штрихом представляет собой простой и эффективный метод выделения чистых культур бактерий (разд. 8.4.1). Методы посева нанесением жидкой культуры на поверхность твердой среды, глубинного посева и послойного посева также пригодны для подсчета жизнеспособных бактерий (разд. 11.2). Другими методами, основанными на использовании твердых сред, являются посев с помощью бархатных репликаторов (разд. 13.6.2 и 20.2.5), а также ауксанографический метод (разд. 20.2.6).

В этой главе мы достаточно подробно рассмотрим основные отвердители, используемые для получения твердых сред, и их применение в бактериологии, поскольку эти вещества в других разделах данного руководства не рассматриваются. Общие подходы к существу данного вопроса отражены в обзоре Коднера [6].

9.1. ОТВЕРДИТЕЛИ 9.1.1. Агар

Агар получают путем экстракции из некоторых видов красных морских водорослей; это самый распространенный из отвердителей бактериологических сред. Он состоит из двух полисахаридов — агарозы и агаропектина, причем первый из них составляет около 70% всей смеси. После первой экстракции агар бывает загрязнен остатками водорослей и другими примесями. Чтобы агар был пригодным для бактериологических целей, большинство

этих примесей необходимо удалить. Опубликован обзор методов экстрагирования и очистки агара в производственных масштабах [4]. Подробные сведения о химическом составе и структуре агара можно найти в работах [4, 17].

Для бактериологических исследований наиболее важны следующие свойства агара: он не разрушается ферментами большинства видов бактерий, агаровые гели устойчивы к температурам до 65 °С или выше, расплавленный агар не превращается в гель, пока не охладится почти до 40 °С, и, наконец, агаровые гели имеют высокую степень прозрачности.

В продаже имеются различные сорта агара, причем в большинстве случаев наиболее пригодным является «бактериологический» агар. «Специальный» и «очищенный» сорта агара с пониженным уровнем примесей в основном используются для электрофореза и серологических исследований, но иногда их применяют также при изучении потребностей микроорганизмов в питании. Для очистки бактериологического сорта агара от примесей существует следующая лабораторная процедура [12]. Гранулированный агар замачивают в 10 объемах дистиллированной воды на несколько часов и затем фильтруют; эту операцию повторяют 10 раз в течение 2 дней. Полученный агар погружают в равный объем 95%-ного этанола, оставляют на 12 ч при комнатной температуре и фильтруют. Затем вновь погружают агар на 4 ч в свежий раствор этанола и фильтруют еще раз. Добавляют агар к кипящему 95%-ному этанолу, доводят до кипения и фильтруют. Отмытый агар сушат при комнатной температуре.

Для приготовления твердой агаровой среды вначале доводят рН основной жидкой среды до желаемой величины и затем добавляют гранулированный агар. Бактериологический агар или агар более высоких сортов незначительно изменяет рН среды. Для получения твердой среды используют 15—20 г агара на 1 л, а полужидкой— 1,5—4 г/л в зависимости от требуемой концентрации. Для получения среды определенной степени твердости требуются разные концентрации различных марок и сортов агара, поэтому необходимо всегда руководствоваться инструкциями фирмы-изготовителя.

После добавления агара к основной жидкой среде смесь нагревают до кипения, чтобы полностью растворить агар. Если нагрев производится над пламенем или на горячей плите, среду постоянно мешают в течение нагревания, чтобы не допускать осаждения агара на дно, где он может карамелизоваться и обуглиться. Дают среде покипеть приблизительно 1 мин; при этом следят, чтобы агар не вспенивался и не выплескивался через край. Агар можно также растворить на пару или в микроволновой печи в течение определенного времени. После того как агар растворится, его размешивают для получения равномерной концентрации во всей среде. Расплавленную среду разливают в пробирки, колбы или бутыли и стерилизуют в автоклаве.

Примечание. Если требуется агаровая среда со значением рН 6,0 или ниже, сначала готовят и стерилизуют среду с величиной рН выше этого значения, иначе агар в процессе нагревания будет гидролизоваться и потеряет способность затвердевать при последующем охлаждении среды. Сразу же после с

страница 65
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 1" (4.60Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(25.07.2017)