Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 1

Автор Ф.Герхардт

использования с иммерсионными объективами, благодаря чему передней линзе объектива обеспечивается среда с необходимыми преломляющими свойствами. Их показатель преломления близок к показателю преломления стекла, поэтому масло и стекло составляют однородную систему. Иммерсионные масла «проясняют» также высушенный на стекле бактериологический препарат благодаря тому, что они проникают в окрашенные клетки и покрывают их.

Имеющиеся в продаже масла, рекомендованные изготовителями микроскопов, проверены и с гарантией не оказывают кислотного или растворяющего воздействия на линзы или их крепления; заменители не рекомендуются, их использование может привести к ложной экономии. Выбор масла зависит от конкретных требований. Может, например, потребоваться особо вязкое масло, если нужно, чтобы оно заполняло очень широкие промежутки или не вытекало при работе с горизонтальным или обращенным микроскопом, а для люминесцентной микроскопии особенно важно, чтобы масло возможно меньше флуоресцировало. Для общих целей предпочитают масло с высокой вязкостью (мы используем масло типа В с вязкостью 1250 сП фирмы Cargille Laboratories Inc., Cedar Grove, NJ 07009), которое почти не стекает и не растекается. Единственная трудность, порождаемая высокой вязкостью, заключается в более длительном удержании маслом пузырьков воздуха, но этого можно избежать.

Иммерсионные объективы следует всегда протирать после использования или по крайней мере в конце рабочего дня. Современные неокисляющиеся масла доставляют меньше забот, чем традиционное кедровое масло (которое затвердевает и оставляет неприятные следы), но и они все же претерпевают медленные изменения; к тому же они могут затечь куда не следует.

Предупреждение. Масла безопасны в работе, но до 1972 г. в их состав часто входили производные полихло-рированного дифенила, которые в настоящее время признаны канцерогенными и токсичными; поэтому просмотрите старые пузырьки!

Никогда не берите масла больше, чем нужно (обычно хватает одной капли). Хороший пузырек для масла помогает уменьшить беспорядок в работе. Используйте либо сжимаемый пузырек, либо стеклянный пузырек с широким основанием и приспособлением для нанесения масла (стеклянная палочка или проволочная петля), которое прикреплено к крышке пузырька. Среди лучших вариантов укажем двухкамерный пузырек, в котором крышка превращена в емкость для масла, а внизу содержится ксилол для протирки.

Приведение в контакт конденсора с нанесенным на него маслом и предметного стекла может быть самой трудной операцией для тех, у кого не очень хорошие руки. Масло должно обладать высокой вязкостью, и при работе с ним необходимо соблюдать некоторые предосторожности как при установке, так и при удалении препарата. Лучше всего действовать так:

1. Нанести каплю масла на верхнюю линзу конденсора, после чего опустить конденсор ниже уровня предметного столика. При нанесении капли следить за тем, чтобы в масло не попадали пузырьки воздуха.

2. Нанести каплю масла на нижнюю сторону предметного стекла под тем местом, которое вы хотите просмотреть.

3. Опустить предметное стекло на предметный столик микроскопа так, чтобы капля оказалась в центре отверстия, и придерживать предметное стекло, подгоняя препаратоводитель или зажимы, которые должны его фиксировать.

4. Поднять конденсор так, чтобы обе капли встретились и чтобы его верхняя линза была полностью покрыта маслом.

5. Установив нужный объектив на фокус, настроить конденсор, чтобы получить освещение по Келеру (разд. 1.3.1).

6. При разборке системы, прежде чем убрать предметное стекло с образцом, следует опустить конденсор. В результате активных боковых перемещений масло может затечь под предметный столик. Об этом нужно помнить и каждый раз проверять, протирая после работы специальной бумагой верхнюю линзу.

7. Для нанесения иммерсии годятся только конденсоры с несъемной или навинчивающейся верхней частью. Наносить масло на подвижную верхнюю часть некоторых «универсальных» конденсоров (т. е. часть, которую с помощью рычажка отводят в сторону при работе с низким увеличением) нужно в высшей степени осторожно или не наносить его совсем.

1.6. УХОД ЗА МИКРОСКОПОМ

Микроскопы отличаются прочностью и долговечностью. При надлежащем уходе и некоторой защите (особенно от неблагоприятного воздействия содержащего кислоты воздуха некоторых лабораторий) они прослужат положенный им срок или даже больше. Однако

3—1260

33

для этого необходимо выполнять следующие правила по уходу за микроскопом.

1. Защищать микроскоп от попадания песка и пыли. Следует зачехлять микроскоп, когда он не используется; лучше всего использовать жесткий прозрачный стеклянный или пластмассовый колпак, вмещающий в себя микроскоп и его принадлежности. Не допускать скопления пыли, которая может проникнуть в линзы и механические части микроскопа.

2. Чистить и смазывать движущиеся части, особенно реечный механизм и шестерни (подойдет смазка для шестерен игрушечных поездов, имеющихся в соответствующих магазинах) следует по возможности реже. Не следует использовать для несущих поверхностей и зубчатых колес в качестве смазки жидкое масло, так как в этом случае тубус или конденсор могут опускаться под собственным весом.

3. Регулярно чистить предметный столик, вытирать любой пролитый на него материал.

4. Держать линзы чистыми, особенно тщательно очищать их после работы с иммерсионным маслом. Никогда не пускать в ход пальцы вместо специальной протирочной ткани для линз (см. ниже).

5. Не пытаться ремонтировать линзы объективов или сложные механизмы с точной настройкой. Лучше предоставить делать это специалистам. Хорошему микроскопу профессиональная чистка и настройка нужна раз в 20 лет или около этого. Те, кто имеет дело с микроскопами, обычно связаны с ремонтными мастерскими или могут порекомендовать их.

6. Тубус все время должен быть закрыт окуляром, а в объективные гнезда должны быть вставлены объективы или заглушки, чтобы по возможности не допускать попадания пыли в тубус.

Старые, заслуженные микроскопы можно почистить, отремонтировать, если в этом есть необходимость, и снова дать им возможность хорошо служить. Старые латунные корпуса (как они элегантны!) можно протереть сначала тряпочкой, слегка смоченной в масле, а затем сухой. Современную отделку достаточно протирать влажной тряпочкой.

Оптические поверхности требуют специального ухода. В связи с этим должны выполняться некоторые общие правила.

1. Необходимо иметь достаточный запас ткани для линз («линзовой бумаги»), мягкую щетку (кисточка размером 0,6 см, для акварельных красок), резиновую грушу (с прикрепленной к ней короткой тонкой резиновой трубкой). Все эти предметы должны находиться вблизи того места, где вы занимаетесь микроскопией. Следует содержать эти предметы в чистоте, лучше всего в коробке с крышкой.

2. Неприставшую пыль легко удалить, смахнув ее кисточкой, сдувая резиновой грушей или протирая тканью оптическую поверхность, на которую лучше предварительно подышать.

3. Следы от пальцев или другой приставший маслянистый материал и грязь можно вытереть тканью для линз, обернув ее вокруг пальца и слегка увлажнив ксилолом или бензолом. Нельзя заливать линзы растворителями и использовать спирт, эфир или ацетон. Это опасно тем, что последние могут проникнуть в клей между линзами. Если у линзы есть выступающая оправа, края линзы можно очистить линзовой бумагой, навернутой на палочку.

4. Если ксилол не удаляет грязь, стоит попробовать смочить бумагу дистиллированной водой.

5. Масло, жидкое и застывшее, эффективно удаляется только что отломленным кусочком пенопласта (распространенный упаковочный материал), если прижать его к передней линзе объектива и производить вращательные движения (способ Пабста, цитируемый Джеймсом [7]). Такая легкость удаления масла обусловлена липофильными свойствами пенопласта. Поскольку ксилол растворяет пенопласт, их нельзя использовать совместно.

6. Обычно масло с линз объектива и конденсора удаляют линзовой бумагой (большую его часть), а остатки его окончательно снимают бумагой, увлажненной ксилолом.

7. Никогда не следует разбирать объектив, чтобы почистить составляющие его элементы, так как расстояния между линзами играют очень существенную роль.

3*

35

Пыль с задней линзы выдувают или снимают очень чистой кисточкой.

8. Постоянно существующая проблема — это пыль на окулярах, которая дает темные пятна, движущиеся по кругу, когда вы вращаете окуляр. Окуляры устроены довольно просто (верхняя и нижняя линзы с распорной вставкой и диафрагмой между ними), и обе их линзы легко вывинтить. Если при очистке наружных верхней и нижней поверхностей пятна не исчезают, по-видимому, их дают частицы на внутренних поверхностях. Следует обратить особое внимание на поверхности просветленных линз (имеющие антиотражательное покрытие, переливающееся цветами радуги) и с осторожностью применять щеточку или ткань при их очистке.

9. Нельзя касаться пальцами оптических поверхностей!

10. Чистые линзы значительно улучшают качество изображения.

1.7. НЕИСПРАВНОСТИ

Перечень неисправностей, их причин и способов устранения, приведенный в табл. 1.1, взят из превосходной книги Джеймса [7]. Если все это не подходит к тому, с чем вы столкнулись, нужно обратиться к книгам или к опытному микроскописту (или лаборанту), обслуживающему микроскопы, и выяснить природу неполадки— механической, оптической или кроющейся в исследуемом образце. Если дело в оптике, проверьте ее по порядку вдоль светового пути, начав с лампы и затем переходя к конденсору, образцу, объективу и окуляру. Регулировкой на каждом из этих этапов определите ее влияние на исправность; в этом вам поможет табл. 1.1.

1.8. ОПТИМАЛЬНЫЕ УСЛОВИЯ РАБОТЫ

Долгие часы сидения перед микроскопом сильно утомляют исследователя, если он не нашел для работы удобную и прямую позу. Если стол и стул не соответствуют друг другу по высоте, то работающий или сутулится, или слишком вытягивается. При такой ситуации не помогут никакие наклонные тубусы с окулярами, СиТаблица 1.1. Распространенные неисправнос

страница 6
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 1" (4.60Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(22.09.2017)