![]() |
|
|
Методы общей бактериологии. Том 1и 0,5 г СаСОз. Вместо дистиллированной используют водопроводную или морскую воду. * В пресной воде клетки не растут, даже при добавлении NaCl; оптимальный рост наблюдается в среде, содержащей от 70 до 100% морской воды, I мМ. NaNOj и перечисленные неорганические соли. Источником углерода служит атмосферная со5. 0 Среду периодически аэрируют воздухом, содержащим 5% С02. Источником энергии, азота и углерода служит тиоциаиат калия (0,2 г/л). Thiobacitlus thioparus ие растет иа таких сложных средах, как среды, содержащие питательный бульон, пептон, дрожжевой экстракт или гидролизат казеина. е После стерилизации к среде добавляют с соблюдением правил асептики 200—400 мг Na2S-9H20, 168 мг NaHCOs и 410 мг ацетата иатрия или 320 мг метилового спирта (общий объем 1 л). ^ На 1 л среды добавляют 2 г цитрата аммония. s На 1 л среды добавляют 1 г глицерофосфата калия и 0,5 г ЭДТА. В качестве источников углерода используются L-глутамат, пировииоградная кислота, ацетат и лактат, но наилучший рост наблюдается в присутствии смеси 5 Г L-глутаминовой кислоты и 10 г DL-лактата (иа 1 л среды). На 1 л среды добавляют 3 г целлобиозы, 20 ммоль ацетата, 1 ммоль изовалериата и 1 ммоль изобутирата. Отдельно в атмосфере N2 автоклавируют растворы, содержащие 0,5 г Na2S-9H26 и 4 г Na2C03, и затем добавляют их к среде непосредственно перед посевом. ' Для роста иа этой среде необходимо довольно большое количество активного ииокулята. 'Для большинства этих сред глюкозу стерилизуют отдельно (обычно автоклавироваиием) и добавляют с соблюдением правил асептики к стерильному раствору других компонентов. ь На 1 л среды добавляют 1 мг хелатироваииого железа, 30 мкг Na2MoCv2H50; 0,6 мкг СоС12-6Н20, 6 мкг CuS04-5H20 и 30 мкг ZnS04'7HsO. 'на 1 л среды добавляют 1 мг хелатироваииого железа, 100 мкг Na2Mo04-2H20, 2 мкг СоС12-6Н20, 100 мкг ZnS04-7HaO и 20 мкг CuS04-5HaO. т На 1 л среды добавляют 1,56 г элементной серы, про-стерилизованиой отдельно автоклавироваиием. "На 1 л среды добавляют 1 мг Na2Mo04>2H20. да К О ?к s •s 5Г л о X 5Г гае > х -+ о •о 51 Продолжение табл. 7.11 На 1 л среды добавляют 0,8 мкг Мо (в виде молибдата аммония) 10 мг Zn (в виде ZnS04-7H20), 4 мг В (в виде НзВОз), 1 мг Си (в виде CuSCv5HsO) и 1 мг Со (в виде CoSCv7HsO). р На 1 л среды добавляют 4 мг CoCls-6HsO. " На 1 л среды добавляют по 100 мг L-цистииа и L-трип-тофаиа. г На I л среды добавляют 300 мг L-алаиина, 400 мг L-ap-гинииа, 750 мг L-аспарагииовой кислоты, 200 мг L-Цистеина, 750 мг L-глутамииовой кислоты, 200 мг глицина, 500 мг L-гистиднна, 200 мг DL-нзолейцина, 200 мг L-лейцина, 800 мг L-лизииа, 150 мг DL-метиоиииа, 200 мг DL-феиилаланина, 500 мг L-пролииа, 400 мг DL-серииа, 200 мг DL-треоиииа, 200 мг L-триптофаиа, 100 мг L-тирозииа и 300 мг L-валина. s На 1 л среды добавляют по 200 мг каждой из следую-?п щих аминокислот: L-триптофаиа, L-цистеина, DL-треоиина, о DL-метиоиииа, DL-валииа, DL-лейцина, DL-изолейцииа, DL-лизииа, DL-фенилаланина, L-тирозииа, L-пролина, глицина, DL-аланина, D-аргинина, DL-серина, L-глутаминовой кислоты и L-аспарагииовой кислоты. ' На I л среды добавляют по 0,2 г каждой из следующих аминокислот: DL-аргииииа, DL-валииа, L-глутаминовой кислоты, DL-серина, DL-гнстидииа, DL-изолейцииа, DL-лейцина, L-тирозина, DL-метионина, DL-триптофана и DL-фенил-алаиииа. и Замена гидролизата хазеина восемнадцатью аминокислотами не влияет на интенсивность и скорость роста. v Исключение из среды гидролизата казеина не влияет иа рост. Это доказывает, что соли аммония могут служить единственным источником азота. w На I л среды добавляют по 5 мг аденина, гуанина, урацила и ксаитииа. Гуанин или ксаитии удовлетворяют потребности бактерий в пуринах. Для некоторых штаммов достаточно добавить адеиии. х На 1 л среды добавляют по 5 мг гуаиииа, адеиииа, ура-цила и ксантина. ^ На 1 л среды добавляют по 5 мг ксаитииа, гуанина, аденина, тимина и урацила. 2 На 1 л среды добавляют 100 мкг биотииа, 10 мкг фолиевой кислоты, 2 мг никотиновой кислоты, 1 мг пантотената кальция, 2 мг солянокислого пиридоксииа, 1 мг рибофлавина и 1 мг солянокислого тиамииа. Пантотенат, никотиновая кислота и биотии, необходимы для роста всех штаммов или значительно стимулируют его. аа На 1 л среды добавляют 5 мг пиридоксаля, 1 мг ий- > котиновой кислоты, 1 мг пантотената кальция, 1 мг рибо- Q флавина, 1 мг тиамииа, 1 мкг витамина Вц, 10 мкг биотииа, 5 мкг л-аминобензойной кислоты и 10 мкг фолиевой кислоты. _ На 1 л среды добавляют 10 мкг биотина. Потребности „ в биотине можно удовлетворить за счет бноцитииа или де- Q тиобиотина, а также 1000-кратиого избытка твииа 80 или о олеата натрия. -I сс На 1 л среды добавляют 5 мг никотиновой кислоты, 1 мг пантотената кальция, 1 мг пиридоксииа, 100 мкг биотина и 0,01 мг лейковорина. Некоторым штаммам Pediococcus необходимы мевалоиовая кислота и рибофлавин. ^На 1л среды добавляют 2 мг тиамииа-НС1, 2 мг пантотената кальция, 2 мг рибофлавина, 2 мг иикотииамида, 1 мг лирндоксамииа-2НС1, 1 мг пиридоксаля-НС1, 1 мг пнрндокси-иа-НС1, 0,1 мг /г-аминобензойиой кислоты, 0,05 мг биотииа, 0,05 мг фолиевой кислоты и 0,005 мг кобаламина. На 1 л среды добавляют 2 мг никотиновой кислоты и 0,5 мг биотина. Продолжение табл. 7.12 Количество (в единицах, указанных в колонке 1) на 1 л среды Компоненты 54Са 55С* 56СС 57Cd 58С* 59с/ 61 сп 62 С езс' 64В-' 65С* 66С1 Микроэлементы ДаР ДаР Да? Да' Аминокислоты Да* Да' Да" Да* Да™ Да* Да* Да* Дааа Да&* Дасс Да^ Кислотный гидро-лизат казеииа (г) 5,0** 5,0// 5,0^ Пурины и пиримиди-ны JXahh Да" Да"' Да*к да» Датт дапп Витамины Да00 Да" Да*? Дагг Дам Да" дааа Да™ Да** ДаУУ Да« РН 7,1 6,8— —7,0 6,8 7,0 7,0 7.6 7,0--7,4 7,4 6,8 7,8 6,5 7,0 6,0 Урожай клеток на синтетической и комплексной средах одинаков, но в первом случае количество образуемого эн-теротоксина в 7 раз ниже, чем во втором. Для роста в анаэробных условиях необходимо добавлять к среде пурины и урацил нли ацетат (10 мМ) нлн пируват. Ацетат можно заменить мевалонатом, взяв его в 10 раз меньше, чем ацетата. * Глюкозу автоклавнруют с другими компонентами среды. В присутствии фолнновой кислоты (цитроворнна) эта среда поддерживает хороший рост некоторых штаммов Pediococcus. с Глюкозу автоклавнруют с другими компонентами среды. На 1 л среды добавляют 20 г цитрата натрия. 1 Глюкозу автоклавнруют вместе с другими компонентами среды. На 1 л среды добавляют 0,01 г олеиновой кислоты, 1 г твнна 40 (детокснкант олеиновой кислоты) и 25 мг ферментативного гидролизата казенна. Этот гндролизат можно частично заменить 10 мг глутамина, который отдельно стерилизуют фильтрованием. Глюкозу автоклавнруют вместе с другими компонентами среды. На 1 л среды добавляют 500 мг L-аскорбнновой кислоты, 300 мг L-глутамнна (отдельно стерилизуют фильтрованием) и 1 мг спермина-НС!. ' Глюкозу автоклавнруют вместе с другими компонентами СО Добавляют 0,1 г L-аспарагнна. Добавление к I л среды 0,1 г ацетата аммония и 1 г ИаНСОз улучшает рост. g Для Bacillus cereus и В. brevis необходимы некоторые кислоты, перечисленные в среде 58С, но витамины для них не требуются. В. alvei нуждаются в аминокислотах и тиамине, В. ctrculans и В. coagulans — в аминокислотах и обычно тнамине и биотине, В. sphaericus — в аминокислотах, тнамн-не и биотиие, В. pasteurii —- в аминокислотах, тнамнне, бно-тине, никотиновой кислоте и аммонии (1% NH4C1). Оптимальный рост В. pasteurii наблюдается при рН 8,5 и температуре 28 °С. В. anthracis также растет на среде с аминокислотами. Для некоторых штаммов нужен тиамни, их рост стимулируется аденознном и (нли) адеииловой кислотой. Большинство видов этого рода являются аэробными, однако некоторые штаммы, например В. cereus, могут также расти в анаэробных условиях. f Bacillus subtilis, В. licheniformis и В. megaterium ие нуждаются в витаминах. В. pumilus и В. polymyxa в качестве источника азота используют соли NH4+; оии нуждаются также в бнотнне. В. macerans растут на среде 59С при добавлении в нее биотииа и тнамниа. ^ В качестве восстанавливающих агентов к среде добавляют меркаптоацетат (0,05%) и цнстенн (0,025%). Для быстрого и равномерного роста необходима С02. Некоторые штаммы Clostridium botulinum растут на синтетической среде только после добавления ферментативного гидролизата казенна (5 г/л) нли заменяющих его факторов: NaHCOs (200 мг/л), дрожжевого экстракта (5 г/л) нли оксалацетата (5 г/л). Клетки С. parabotutinam (тип А и В) и С. sporoge-nes хорошо растут на среде 60С, однако прн этом титр токсина в 7 раз ниже, чем прн росте на бульоне из экстракта сердца и мозга. ^ На 1 л среды добавляют 5 г тногликолата натрия. На среде 61С клетки растут хуже, чем на бульоне из экстракта сердца и мозга. ' На 1 л среды добавляют 0,15 г нитрилотрнуксусной кислоты и 0,01 г Na2S-9H20. Нужное значение рН среды устанавливают с помощью трнса. среды. На 1 л среды добавляют 500 мг аскорбиновой кислоты, 1,67 г ацетата калия и 10 Мл раствора твин-олеата, содержащего 2 г твииа 40, 20 мг олеата натрия и воду до 20 мл. "* Если нет специальных указаний, глюкозу стерилизуют отдельно автоклавированнем, а затем добавляют ее с соблюдением правил асептики к стерильному раствору других компонентов. п Стерилизуют отдельно фильтрованием. ° Вместо КгНР04 используют (NH4)2HP04. Р На 1 л среды добавляют 2 мг молнбдата аммония. ^ На 1л среды добавляют 8 мг ZnS04-7Ha0, 4,5 мг CuS04-5H20, 9 мг СоСЬ, 6 мг СаС12-2НаО, 14 мг NajB4O;-10H2O и 2,5 мг (NH4)aMo04. rHa 1 л среды добавляют 0,114 мг Н3ВОз, 0,31 мг CuS04-5H20, 2,8 мг Fe(NH2) (S04)2-6H20, 0,01 мг CoS04-7H20, 0,12 мг MnS04-HsO, 0,07 мг (NH4)eMo7Oj4-4HaO и 1,6 мг ZnS04-7H20. 5 На 1 л среды добавляют по 25 мг глицина, валина, лейцина, треоиииа, феннлаланниа, тирозниа, цистеина, метнони-иа, пролина, аргинина, гнстидина и триптофана. ' На 1 л среды добавляют 200 мг DL-a-аланииа, 242 мг L-аргннина-НС], 400 мг L-аспарагина, 100 мг аспарагиновой кислоты, 50 мг L-цистенна, 300 |
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 |
Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 1" (4.60Mb) |
[каталог] [статьи] [доска объявлений] [обратная связь] |