Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 1

Автор Ф.Герхардт

* 50 мкг гематина и 10 мкг олеиновой кислоты растворяют в 0,001 н. NaOH и автоклавируют. Гематии можно заменить любым веществом, разлагающим HjOi. Гематнн не нужен для роста бактерий в анаэробных условиях. В раствор добавляют 10 г молочной кислоты (85%). Одна глюкоза подавляет рост бактерий в аэробных условиях, но в сочетании с другим источником углерода, например с молочной кислотой или сахарозой, она обеспечивает удовлетворительный рост.

г

На 1 л среды добавляют 4,4 г лактата натрия (70%). ^ Среду стерилизуют фильтрованием.

е Добавление гематииа и крови и инкубация при пониженном атмосферном давлении необходимы в том случае, когда пользуются твердой средой.

Добавляют 5,8 г яблочной кислоты и с помощью NaOH доводят рН среды до 6,8.

^ На 1 л среды добавляют 1 мг гемииа и летучие жирные кислоты до конечной концентрации: 2,8-10—2 М уксусной кислоты, 9-Ю-3 М пропионовой кислоты, 4,5-Ю-3 М «-масляной кислоты, 9-10—4 М изомасляной кислоты, 9'Ю-4 М к-валериановой кислоты, 9-10—4 М изовалериаиовой кислоты и 9-Ю-4 М DL-метилмасляной кислоты. Перед использованием добавляют 4 г Na^COs и 0,25 г цистеииа^НС! (оба компонента раздельно стерилизуют фильтрованием). Культуры Bacteroides ruminicola инкубируют в бескислородной атмосфере, содержащей COs.

* В качестве источника углерода в этой среде используется солянокислый холин (5 г/л). Другие источники углерода: лактат, малат и пируват. На 1 л среды добавляют 2,6 г Na2SO« и 1 мг NajMoO*. Для удаления кислорода из куль-туральной среды используется NasS-9HjO (0,005%) или бисульфит натрия (0,0035%). С02 (включен в среду в виде 0,3—0,5% NaHC03) и дрожжевой экстракт (0,1—0,2%) являются стимуляторами роста.

'Источником углерода служит пируват натрия (3 г/л). Источниками углерода могут быть только компоненты цикла Кребса, а также их близкие производные.

/ На 1 л среды добавляют 250 мг лактата иатрня, 200 мг щавелевоуксусной кислоты, 5 мг поливинилового спирта, 87 мг тетрагидрохлоридспермииа, 1 мг гемина, 4% (объем/объем) 2,2',2"-нитрилотриэтанола, 2 мг NAD, 0,46 мг тн-аминпирофосфатхлорида, 42 мг NaHC03 и 1 г K2SO4. Перед добавлением к среде щавелевоуксусной кислоты, NAD и ти-амннпирофосфатхлорида их следует по отдельности просте-рилизовать фильтрованием.

ь

На 1 л среды добавляют 5 г молочной кислоты, 0,42 г лимонной кислоты-HsO и 0,004 г ЭДТА.

' На 1 л среды добавляют 10 мл 85%-ной молочной кислоты, 0,75 г гликолата натрия и 4,5 мг путресцииа. Используется только свежеприготовленная среда. Посевы делают немедленно после охлаждения среды.

№ S О X К

2: s л

01

п

к

м

е

н о ?а

Е

Продолжение табл. 7.10

Для большинства этих сред глюкозу стерилизуют отдельно (обычно автоклавироваиием) и добавляют с соблюдением правил асептики к стерильному раствору, содержащему другие вещества.

п В этом случае глюкозу автоклавируют вместе с другими компонентами среды; производные глюкозы, автоклавируе-мой вместе со средой (но ие сама глюкоза), являются стимуляторами или необходимы для роста.

° Для морских штаммов в среду добавляют 2,5% NaCl.

рНа 1 л среды добавляют 0,44 мг ZnS04-7H20, 0,4 мг СоС12-6Н20 и 0,27 мг СиС12-2Н20.

q Растворяют MgS04-7H20 (количество указано в таблице) и 80 мг FeS04(NH4)2S04-6H20 в 8,7-10—8 М лимонной кислоте и автоклавируют.

т Растворяют 29 мг Fe(NH4)2(S04)2-6H20 в 0,02 М НС1 и ся стерилизуют фильтрованием.

s На 1 л среды добавляют 1 мл раствора, содержащего 5% MgS04, 0,5% MnCl2-4H20, 0,5% FeCh и 0,4% иитрилотри-уксусной кислоты.

* На 1 л среды добавляют 7,2 мг ZnS04-7H20, 1,4 мг CuSOi-HjO и 1.4 мг CoS04-5H20.

а На 1 л среды добавляют I мг СоС12-6Н20.

v На 1 л среды добавляют по 1 мг СоС12-6Н20, VS04-7H20, ZnS04 и NaMo04-2H20, 0,5 мг CuS04-5H20 и 20 мг нитрило-триуксусной кислоты.

v На 1 л среды добавляют по 1000 мг DL-аланина, DL-ac-парагиновой кислоты и L-глутаминовой кислоты; по 200 мг L-аргииннаНС! и Ь-лизииа-НС1-Н20 и по 100 мг L-гистиди-на, L-лсйцина, L-изолейцина, L-метионина, L-фенилаланина, L-пролина, L-треонина, L-тирозина, L-валина, L-триптофана, L-цистеина, L-серина и L-глицииа.

На 1 л среды добавляют 500 мг аспарагиновой кислоты 1300 мг L-глутаминовой кислоты, 150 мг Ь-аргинииа'НС1 25 мг глицина, 50 мг L-серина, 90 мг L-лейцина, 30 мг L-изо лейцина, 60 мг L-валина, 70 мг тирозина, 100 мг L-алаиина 50 мг L-лнзина-НС!, 50 мг L-пролииа, 80 мг L-триптофана, 50 мг L-треонина, 25 мг L-феиилаланииа, 25 мг L-acnapam на, 61,25 мг цистеина-НС1-Н20 (стерилизуют отдельно фильтрованием), 36 мг цистина, 50 мг L-глутамииа (стерилизуют отдельно фильтрованием), 14,9 мг L-метиоиииа, 46 мг глута-тиона (восстановленного) и 16,5 мг гистидииа.

^ На 1 л среды добавляют 0,1 г L-аргииииа-НС!, 10 мг L-4HCTeHHa-HCbHaO, 150 мг глицина, 1,18 г глутамииовой кислоты и 21 мг серина.

ее На 1 л среды добавляют 120 мг DL-триптофана, 5000 мг &

глутамата натрия, 150 мг L-тирозина, 250 мг DL-фенилала- >

нина, 400 мг L-аргииина-НС!, 300 мг Ь-гистидина-НС1-Н20, Q

200 мг глицина, 400 мг DL-валина, 2000 мг DL-серииа, 125 мг д<

DL-изолейцина, 350 мг L-цистеина-НС!. _

На 1 л среды добавляют 12,5 мг L-цистеина-НС!, 50 мг *д

DL-триптофана, 20 мг L-тирозииа, 10 мг L-пролина, 20 мг q

DL-фенилалаиииа и 10 мг DL-гистидина. О

Н

^ Хотя кислотный гидролизат казеина кроме аминокислот содержит несколько минорных компонентов и, следовательно, среда ие является «синтетической» в строгом смысле, ее обозначают буквой «С», так как казеин очищают адсорбцией на активированном угле Norit А при двух различных концентрациях ионов Н+ и в среду добавляют некоторые известные связанные с казеином компоненты, например полиамины и витамины.

ЛЛ На 1 л среды добавляют по 10 мг гуаиииа, аденина и урацила.

" На 1 л среды добавляют 3,2 мг гипоксантина и 8 мг урацила.

^ На 1 л среды добавляют по 10 мг гуанина, урацила и гипоксаитинз.

TO

На 1 л среды добавляют 0,1 г глицина, 0,1 г DL-алани-на, 0,15 Г DL-валина, 0,15 г DL-лейцина, 0,1 г DL-изолейци-иа, 0,2 Г DL-аспарагнновой кислоты, 0,2 г DL-глутамииовой кислоты, 0,2 г L-пролина, 0,1 г DL-феиилалаиииа, 0,1 г DL-тирозина, 0,04 г L-аргииииа, 0,03 г DL-гистидина, 0,2 г DL-серина, 0,2 г DL-треонииа, 0,2 г DL-метионина и 0,4 г L-цистнна. Первые 12 аминокислот растворяют в 0,033 М фосфатном буфере и стерилизуют автоклавированием; серии, треонин и метионин растворяют в воде и стерилизуют фильтрованием; L-цистин растворяют в НС1 и стерилизуют фильтрованием.

^ Любая из следующих аминокислот в концентрации 0,62 или 0,36 М может служить источником углерода, азота или энергии: глутамииовая кислота, аспарагиновая кислота, серии, пролин, а-аланин, аспарагин, глутамин и треонии. Однако рост улучшается после добавления смеси аминокислот или равного количества казаминовых кислот. Источниками углерода могут служить также глюкоза, мальтоза и сахароза.

Z На 1 л среды добавляют 2,5 Г L-аспарагина.

аа На 1 л среды добавляют 37 мг DL-аланина. 120 мг DL-аспарагиновой кислоты, 90 мг L-аргинииа-НО, 13 МГ L-цистеина-НС1 (цистеин автоклавируют отдельно, и затем его добавляют с соблюдением правил асептики к стерильному раствору остальных компонентов), 642 мг L-глутаминовой кислоты, 10 мг глицина, 68 мг L-гистидина-НСЬНгО, 94 мг DL-изолейцина, 100 мг DL-лейцина, 155 мг Ь-лизина-НС1, 65 мг DL-метионина, 78 мг DL-фенилалаиииа, 175 мг L-пролина, 100 мг DL-серииа, 70 мг DL-треоиина, 31 мг DL-тркп-тофаяа, ПО мг L-тирозииа и 160 мг DL-валииа.

&6 На 1 л среды добавляют по 60 мг каждой из следующих аминокислот: алаиина, аргииииа, аспарагииовой кислоты, цистеина, глутамнновой кислоты, глнцииа, гнстидииа, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, орнитина, оксилро-лииа, фенилаланина, пролииа, серина, треонина, триптофана, тирозина и валина. Замена этих кислот гидролизатом казеина не изменяет скорость роста и его интенсивность. Если не добавлять эти аминокислоты в среду, то концентрацию NH4C1 следует увеличить до 2 г/л среды.

ъъ

На 1 л среды добавляют 30 мг гипоксантина и 2 мг урацила.

" На 1 л среды добавляют 20 мг ииозита, 10 мкг фолиевой кислоты, 1 мкг л-аминобензойиой кислоты, 100 мкг рибофлавина, 1 мг пантотсиата кальция, I мкг бнотина, 100 мкг солянокислого тиамииа, 500 мкг никотиновой кислоты, 500 мкг иикотииамида и 2 мг солянокислого пнридоксина.

тт На 1 л среды добавляют 9,5 мг пантотената кальция, 2,4 мг иикотииамида и 3,3 мг солянокислого тиамииа (все эти компоненты стерилизуют фильтрованием),

пп На 1 л среды добавляют 2,4 мг никотиновой кислоты.

00 На 1 л среды добавляют 50 мкг пантотената кальция.

рр На 1 л среды добавляют 2 мг рибофлавина, 2 мг пантотената кальция, 0,05 мг биотина, 2 мг никотиновой кислоты, 2 мг солянокислого тиамииа, 0,02 мг витамина Ви, 0,05 мг DL-липоевой кислоты, 2,0 мг пиридоксаля, 0,1 мг п-амииобензойиой кислоты и 0,05 мг фолиевой кислоты.

9? На 1 л среды добавляют 1 мкг биотина и 1 мг солянокислого тиамина. Пантотенат значительно стимулирует рост.

ТТ На 1 л среды добавляют 2 мг солянокислого тиамииа, 2 мг пантотената кальция, 1,4 мг солянокислого холииа, 3,6 мг миоииозита и 0,7 мг биотина.

SS

На 1 л среды добавляют по 1 мг солянокислого пиридоксаля и пантотената кальция, по 50 мкг солянокислого тиамииа, ииацииа и рибофлавина, 10 мкг л-амииобеизойной кислоты, 2 мкг биотииа и по 1 мкг фолиевой кислоты и витамина В,2.

" На 1 л среды добавляют по 2 мг солянокислого пиридоксаля и солянокислого тиамина, по 200 мкг пантотената кальция и ииацииа, 50 мкг рибофлавина, по 1 мкг п-амииобензойиой и фолиевой кислот и 10 мкг биотииа.

в"рН доводят до 6,8 с помощью твердого К2СО3.

К

О X

к 2 S

М П

S m

е >

н о

ЧЭ

Е

Кислотный гидроли-зат казеина (г) 5,0" 2,0"

Пурины и пиримидины Да» Да* ДаУ

Витамины Да* Дааа Да" Дасс Да** Да"

Твин 80 (мл) 1

рН 7,5— —8,0 7,5--8,0 7,5--7,8 2,5-—3,2 4,8--5,0 7,0--7,2 6,8— -7,4 7,0--7,2 6,7 7,0 5,5 6,5 1 — —9,8

N5 СО

Источником углерода служит COj атмосферы. Клетки снабжаются энергией благодаря окислению нитрита в нитрат. Кроме перечисленных солей I л среды содержит 2 г NaNOe

страница 45
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 1" (4.60Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(29.05.2017)