Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 1

Автор Ф.Герхардт

путресцин, спермин, спермицдн), карнитин, а также вещества, образуемые при автохла-вировании глюкозы с фосфатом или в присутствии аминокислот. Несколько факторов еще не идентифицировано в дрожжевом экстракте и сыворотке.

7.1.8. Определение потребностей питания

При использовании бактерий в качестве тест-организмов в микробиологических и других биологических исследованиях необходимо знать их потребности в питательных веществах, а также влияние на эти потребности других компонентов срецы

При подборе условий выращивания новой выделенной бактерии вначале используют так называемую комплексную среду, состав которой точно определить невозможно, так как она содержит неочищенные компоненты. Обычно в нее входит ферментативный гидролизат белка, обеспечивающий потребность в таких источниках азота, как аминокислоты, сахар (обычно глюкоза) как источник энергии и углерода, различные соли для удовлетворения потребности бактерии в неорганических ионах и дрожжевой экстракт для обеспечения всех потребностей в витаминах. Когда потребности в питательных веществах бактерий приблизительно выявлены, можно использовать полусинтетическую среду. В такую среду вносят известные соединения как явно необходимые; в нее добавляют также небольшое количество дрожжевого экстракта для обеспечения пока еще неизвестных потребностей. В конце концов находят состав синтетической среды, т. е. среды определенного состава, которая полностью удовлетворяет всем потребностям в питательных веществах. Выбор нужной среды зависит от целей эксперимента. Сложные синтетические среды довольно дороги, поэтому чаще используются комплексные среды неопределенного состава.

Основные этапы определения потребностей гетеротрофных бактерий в питательных веществах заключаются в следующем.

1. Бактерии следует выращивать на такой среде (комплексной или синтетической), о которой известно, что она поддерживает их рост.

2. Если начинают выращивать бактерии на комплексной среде, то варьируют концентрации всех компонентов (от нуля до самой большой, при которой они находились в исходной среде), чтобы определить их оптимальные концентрации и необходимость для роста или его стимуляции.

3. Определив оптимальные концентрации, сначала заменяют основной сложный компонент среды, поставляющий азот (например, казеин), на полную смесь аминокислот в тех же концентрациях, которые использовали в средах для аналитического (assay medium) определения веществ (см. табл. 7.14).

?. ЁЙОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

4. Если эта смесь обеспечивает рост бактерий, поочередно варьируют концентрацию каждой аминокислоты от нуля до концентрации, превышающей ту, которая установлена в среде для аналитического определения. Таким образом определяют оптимальную концентрацию каждой аминокислоты в присутствии других. Если же наблюдается ингибирующий эффект, то соответствующую аминокислоту исключают из среды.

5. Заменяют сложный фактор роста, например дрожжевой экстракт, полным набором известных витаминов и затем варьируют отдельно уровень каждого компонента смеси, как и в случае аминокислот. Если в исходной среде в качестве источника аминокислот и витаминов используют дрожжевой экстракт, то стараются заменить его полной смесью аминокислот с полным набором известных витаминов и затем варьируют в среде уровень каждого компонента отдельно.

6. Если бактерии не растут на полученной таким путем среде, то это можно объяснить тем, что они нуждаются в неидентифицированном факторе, или тем, что нарушено соотношение известных факторов роста. Можно также предполагать потребность бактерий в известных факторах роста (пептидах, производных витаминов, жирных кислотах, нуклеотидах, неорганических ионах и др.), которые содержатся в неочищенных компонентах комплексной среды, но отсутствуют в смесях испытываемых синтетических веществ. В этом случае необходимо детально выяснить потребности бактерий в питательных веществах [70].

7. Если работу начинают с использования синтетической среды и не наблюдают хорошего роста бактерий на втором этапе (см. выше), то заменяют источник азота на 10%-ный гидролизат казеина. Если это способствует росту, поступают, как указано на этапе 4; если же интенсивность роста все еще недостаточна, добавляют к среде 1%-ный дрожжевой экстракт. В случае стимуляции роста поступают, как указано на этапе 5.

7.2. СОСТАВЛЕНИЕ СРЕД

Все среды, используемые для культивирования бактерий, перечислить невозможно, поэтому в приведенных ниже таблицах даны ссылки на среды, в которых выращивают чистые культуры большинства известных родов.

7.2.1. Ключ к средам, используемым для выращивания бактерий различных групп

В табл. 7.1 перечислены 192 вида бактерий, представляющих каждую из 19 групп, приведенных в 8-м издании «Определителя бактерий Берги» (Bergey's Manual of Determinative Bacteriology)1. В ней даны также оптимальная температура роста каждого микроорганизма и буквенно-цифровой ключ, помогающий найти состав одной или нескольких известных в литературе сред, поддерживающих рост каждого вида. Строчные латинские буквы в верхних индексах названий бактерий указывают на сноски, в которых приведены подробности культивирования этих бактерий. В колонке буквенно-цифровых ключей приведены номера таблиц (с. 7.2 по 7.13), где даны составы сред. Ключевая буква А обозначает в табл. 7.2—7.7 богатую комплексную среду, буква В в табл. 7.2—7.7 — полусинтетическую среду (несколько сред с кодом В приведено в табл. 7.12 и 7.13), а буква С — синтетическую среду в табл. 7.8— 7.13.

1 Имеется перевод: Краткий определитель бактерий Берги./Под ред. Дж. Хоулта. —М.: Мир. 1981.

В табл. 7.1 перечислены только те бактерии, которые были выращены in vitro в чистой культуре. Большинство приведенных сред не являются минимальными, т. е. они часто содержат вещества, в которых нет специфической потребности, или вещества, содержание которых значительно выше минимальных потребностей бактерий. То, что данную бактерию культивируют именно на указанной среде, еще не означает, что эта среда оптимальна для нее, поскольку детальное изучение потребностей в питательных веществах было проведено далеко не у всех штаммов.

Оптималь- Буквенно-цнфровой

ная тем-

Источник данГруппа, род и виды пература роста, °C b

ключ к среде ных

IV. Почкующиеся и

(или) стебельковые

бактерии:

Ancalomicrobium ade- 30 10А, UC (табл. 7.2, [211]

tum1 7.8)

Asticcacaulis excentri- 25—30 ПА, 12С (табл. 7.2, [162]

cus 7.8)

Caulobacter henricii1'1 30 ПА, 12С (табл. 7.2, [162]

7.8) [162]

Caulobacter halobacte- 25 ПА, 12С (табл. 7.2,

roides'l> m 7.8)

Caulobacter vibrio- 30 ПА, 12С (табл. 7.2, [162]

ides1'" 7.8)

Gallionella ferrugi- 25 13С (табл. 7.8) [74, 150]

nea°> P

H yphomicrobium vul- 25—30 13С (табл. 7.8) [86]

gare1' * [86, 183]

Hyphomonas polymor- 37 12С (табл. 7.2)

pha{

Pedomicrobium ferru- 12С (табл. 7.8) [5]

gineum0 30 [211]

Prosthecomicrob ium

ЮА, ПС (табл. 7.2,

pneumaticum''r 7.8)

V. Спирохеты:

Leptospira canicola1 29 13В, 14С (табл. 7.3, [97, 127, 192]

7.8) [97, 127, 192]

Leptospira pomona1 29 13В, 14С (табл. 7.3,

7.8)

Leptospira grtppoty- 29 13В, 14С (табл. 7.3, [97, 127, 192]

phosa1 7.8)

Трепонема РейтераЛ s 37 14А, 15С (табл. 7.3, [27, 218J

7.9)

Spirochaeta steno- 30—37 15А (табл. 7.3) [85]

streptac>1

VI. Спиральные и

изогнутые бакте-

рии:

Campylobacter fetus0 37 16А (табл. 7.3) [1?7, 190]

Spirillum volutans°>u 30 17А (табл. 7.3) [29, 117]

Группа, род и виды

а

Оптимальная температура роста, °С

Буквенно-цифровой Ь

ключ к среде

Источник данных

VII. Грамотрицательные аэробные палочки и кокки:

Acetobacter aceti Agrobacterlum rhizogenesv Azomonas agilisw Azotobacter chroococcumw

Betferinckia indicaw- x Bordetella pertussis** Brucella melitensisz

Derxia gummosa Francisella tularen-sisaa

Gluconobacter oxy-dans

Halobacterium salina-rium

Melhylomonas metha-nicabb

Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas fluoresces

Pseudomonas lemoig-neicc

Pseudomonas maltophiliadd Pseudomonas putida

Pseudomonas testosterone11

Rhizobium legumino-sarum

Xanihomonas cam-pestrisff

VIII. Грамотрицательные факультативноанаэробные палочки:

Aciinobacillus ligniere-sii

30 18A (табл. 7.3) [46, 93]

25—28 18A, 16C (табл. 7.3, [46, 215]

7.9)

20—30 17C (табл. 7.9) [223]

20—30 17С (табл. 7.9) [12, 58]

30 18С (табл. 7.9) [12, 13]

35—37 19А (табл. 7.3) [127, 185]

34—37 16А, 19С (табл. 7.3, [65, 127, 178,

7.9) 186]

25 20С (табл. 7.9) [96]

37 20А (табл. 7.3) [127]

25-30 18А (табл. 7.3) [45]

37 21А (табл. 7.3) [ЮЗ]

30 22В (табл. 7.3) [541

37 23А, 21С (табл. 7.3, [213]

7.9)

25—30 23А, 21С (табл 7.3, [213]

7.9)

30 23А, 21С (табл. 7.3, [213]

7.9)

35 23А, 21С (табл. 7.3, [213]

7.9)

25—30 23А, 21С (табл. 7.3, [2131

7.9)

30 23А, 21С (табл. 7.3, [213]

7.9)

20 24А, 22С (табл. 7.3, [153]

7.9)

28 18А, 16С (табл. 7.3, [214]

7.9)

37 25А (табл. 7.4) [127, 159]

Группа, род и виды Оптимальная температура роста, °C Буквенно цифровой b

ключ к среде Источник данных

Aeromonas hydrophila 30 26А, 23С (табл. 7.4, [119, 188]

7.9) [127, 144, 198,

Cardiobacterium homi- 30—37 12А, 24С (табл. 7.2,

7.9) 199]

Chromobacterium vio- 30—35 12А, 25С (табл. 7.2, [48, 127, 203]

laceumhH 7.9) [242]

Citrobacter freundii 30—37 26С (табл. 7.9)

Edwardsiella tarda 30—37 12А (табл. 7 2) [109]

Erwinia amylovora1'1 27—30 26А (табл. 7.4) [234]

Escherichia coli 37 26А, 27С (табл. 7.4, [133, 230]

7.9) [147, 239]

Flavobacterium aqua- 20—25 27А (табл. 7.4)

tile

Haemophilus influenzae

Haemophilus parain- 30 27А (табл. 7.4) [243, 247]

37 27А, 28С (табл. 7.4, [84, 247]

fluenzae 7.10)

Klebsiella pneumoniae 35—37 28А, 27С (табл. 7.4, [104]

7.9) [82]

Lucibacterium harveyi 25—30 29А (табл. 7.4)

Pasteurella multocida 37 12А, 29С (табл. 7.2, [100]

7.10) [98]

Proteus vulgaris 34—37 28А, ЗОС (табл. 7.

страница 39
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 1" (4.60Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(26.07.2017)