|
|
Руководство к практическим занятиям по микробиологииа — 1,0—4,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН — 6,8—7,0. 4. Крахмало-аммиачная среда (г): растворимый крахмал — 10,0; (NH4)2S04 —2,0; К2НР04—l,0;MgSO4-7H2O—1,0; NaCI—1,0; САСО3 — 3,0; агар — 15; вода водопроводная — 1000 мл. 5. Среда Чапека (г): сахароза — 30,0 или глюкоза — 20,0; NaN03—2,0; К2НРО4— 1,0; MgS04-7H20 — 0,5; КС1 — 0,5; FeS04-7H20 — 0,1; вода дистиллированная — 1000 мл. 6. Среда БСА (бульон—сусло—агар). Мясо-пептонный бульон смешивают с равным объемом 6 °Б сусла и добавляют 2 г/л агара. Среды стерилизуют при 1,0 или 0,5 ати в зависимости от наличия в них витаминов или других термолабильных факторов. Сахара стерилизуют отдельно при 1,0 ати в виде концентрированных растворов (обычно 40%) и добавляют в среды при посеве. Среды для сахаролитических клостридий 1. Картофельная среда с мелом (см. с. 50). 2. Среда состава (г): глюкоза — 10,0; пептои — 10,0; К2НРО4 — 1,0; СаСОз — 3,0—5,0; вода водопроводная — 1000 мл. Мел стерилизуют отдельно и добавляют к стерильной среде. Среды для молочнокислых бактерий 1. 8—10 °Б сусло с дробиной. К стерильной среде добавляют в избытке стерильный мел. 2. Обезжиренное молоко (обрат). Часто его разбавляют водой в отношении 2:1. 3. Среда MRS состава (г): гидролизат казеина — 10,0; мясной экстракт — 10,0; дрожжевой экстракт — 5,0; глюкоза — 20,0; ацетат натрия — 5,0; цитрат аммония (двузамещенный) — 2,0; твин-80 — 1,0; К2НРО* — 2,0; MgS04-7H20— 0,2; MnS04-4H20 — 0,05; вода дистиллированная — 1000 мл. Среда для сапрофитных коринебактерий Состав (г): гидролизат казеииа — 10,0; дрожжевой экстракт — 5,0; глюкоза — 5,0; NaCI — 5,0; дистиллированная вода — 1000 мл; рН — 7,2—7,4. * Глюкозу и витамины стерилизуют отдельно и вносят в стерильную среду перед посевом. При использовании глюкозы жирные кислоты, образуемые пропионовокис-лыми бактериями, необходимо ежедневно нейтрализовьтать стерильным раствором 10%-ного NaHC03. Среда для сапрофитных микобактерий и нокардий 1. Овсяный агар (ISP — 3) (г): овсяная мука (или хлопья) — 20,0; агар — 3,0 г. Среды для актиномицетов 1. Овсяный агар (ISP — 3) (г): овсяная мука (или хлопья) —20,0; агар — 20,0—25,0; вода дистиллированная — 1000 мл; следы солей — FeS04 — 0,1; МпС13 — 0,1; ZnSO* — 0,1. Вместо дистиллированной воды и солей можно использовать водопроводную воду. Для приготовления среды овсяную муку (или хлопья) варят в 1 л воды 20 мин, фильтруют и доводят объем до 1 л. Среду применяют для хранения и определения культуральных, а также морфологических признаков. 2. Синтетические и полусиитетичеокие среды для актиномицетов Компоненты, г/л водопроводной воды Красиль-никова № 1 № 6 № 71 Гаузе № 1 Вакс-мана Глюкоза 20,0 _ Крахмал растворимый — 10,0 15,0 20,0 — Глицерин ?—? — — — 3,0 Кукурузный экстракт — 10,0 10,0 — — KNOs (NHO2SO4 1,0 — — 1,0 — 3,0 4,0 — ?— КгНР04 0,5 — 2,0 0,5 1,0 NaN03 — ?— — — 2,0 MgS04-7H20 0,5 — 0,5 0,5 КС1 ?— — — — 0,5 NaCl 0,5 3,0 ?— 0,5 — СаСОз 1,0 3,0 3,0 — — FeS04-7H20 следы — — следы 0.01 РН 7,0-7,2 7,0—7,2 6,6—7,2 7,2-7,4 7,0 Указанные среды используют как с агаром, та|к и без него. Среды с кукурузным экстрактом применяют для определения антибиотических свойств. Часто для этой цели используют также среду Гаузе № 2 состава (г); триптон — 2,5 или бульон Хоттиигера — 30 мл; пептон — 5,0; NaCI — 5,0; глюкоза — 10,0; вода водопроводная — 1000 мл; рН — 7,0—7,4. Среду можно использовать и с агаром. Среды для бактерий, использующих целлюлозу 1. Среда Хетчинсона и Клейтона для аэробных бактерий (г), целлюлоза — кусочки фильтровальной бумаги; NaNC»3 — 2,5; К2НРО4 — 1,0; MgS04-7H20 — — 0,3; NaCI — 0,1; СаС12-4НЕ0 — 0,1; FeCl3-6H20 — 0,01; вода дистиллированная — 1000 мл. 2. Среда Имшенецкого для (анаэробных бактерий (г): фильтровальная бумага — .15,0; NaNH4HP04 — 1,5; К2НР04 — 0,5; КН2Р04 — 0,5. MgS04 7Н20 — 0,4; NaCI — 0,1; пептон — 5,0; MnSCy4H20 ~ следы; FeS04 ~ следы; СзСОз — 2,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 7,0—7,4. Среды для уксуснокислых бактерий 1. 4—6 °Б сусло — 100 мл; этанол (ректификат) — 4—5 мл 2. Среда состава (г): глюкоза —il00,0; дрожжевой экстракт — 10,0' СаС03— 20,0; агар — 15,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8. 3. Среда состава (г): дрожжевой экстракт — 5,0; пептон — 3,0; маинит — 25,0; агар —15,0; вода дистиллированная — 1000 мл. 3-ю среду используют для культивирования бактерий рода Giuconobacter. Среды для бактерий рода Caulobacter 1. Картофельный агар. 2. Среда Красильиикова и Беляева состава (г): пептон — 1,0; дрожжевой автолизат — 1,0 мл; MgSCy7H20 ~ 0,2; агар — 15,0; вода водопроводная — 1000 мл. Среда Хирш и Коити для метилотрофов Состав: (NH4)2S04 — 0,5 г; КН2Р04 — 1,36 г; Na2HP04-7H20 — 2,13 г; MgSCV7H20 — 0,2 г; CaCl^HjO — 10,0 мг; MnSO-4H20 — 2,5 мг; FeS04-•7Н20 —5,0 мг; Na2Mo04-2H20 — 2,5 мг; гидрохлорид метиламина — 6,75 мг; агар — 18,0 г.; вода дистиллированная — 1000 мл; рН — 7,2. Непосредственно в питательную среду добавляют 4 г/л метанола. В качестве источника азота в,место (NH4)2S04 можно использовать KNO3 или мочевину в концентрации 100 мМ. Более простой средой является среда Мевиуса состава (г): NaNC»3 — il,0; К2НР04 — 1,0; NaCI — 0,5; MgS04-7H20 ~ 0,5; вода водопроводная — 1000 мл. К 20 мл стерильной среды добавляют несколько капель метанола или после посева колбы помещают в эксикатор, в который ставят открытую пробирку с метанолом. Среды для азотфиксаторов 1. Среда Эшби для азотобактера и олигоиитрофилов (г): сахароза или маинит — 20,0; К2НР04 — 0,2; MgS04-7H20 — 0,2; NaCI — 0,2; FeS04 — 0,1; СаСОз — 5,0; вода дистиллированная — 1000 мл. В среду рекомендуется вносить смесь микроэлементов — 1 мл/л. Раствор микроэлементов (по Федорову) (г): НзВО, — 5,0; (NH4)2 Мо04-2Н20 — 5,0; ZnS04-7HeO — 0,2; KI и NaBr — по 0,5; Al2(S04)318H20 — 0,3; вода дистиллированная — 1000 мл. 2. Среда Виноградского для анаэробных озотфиксагоров рода Clostridium (г): глюкоза — 20,0; К2НР04 — 1,0; MgS04-7H20 — 0,5; СаСОз — 20,0; NaCl, MnS04, FeS04 — среды; вода дистиллированная — 1000 мл. В среду рекомендуется добавлять дрожжевой экстракт — 10 мг/л и раствор микроэлементов по Федорову (см. выше) — 1 мл/л. 3. Среда Федорова в модификации Калининской для выделения азотфикса-торов (г): глюкоза —10,0—15,0; К^НР04 — il,74; КН2Р04—0,91; MgSO^HzO — 0,3; СаС12-6Н20 — 0,1; NaCl — 0,5; FeCl3-6H20 — 0,01; дрожжевой экстракт — 0,015; смесь микроэлементов по Федорову — 1 мл; вода дистиллированная — 1000 мл. 4. Бобовый агар для клубеньковых бактерий. Состав среды (г): бобовый отвар — 1000 мл; сахароза — 2,0; КН2Р04 — 1,0; MgSO^HsO i— 0,3; агар — 15; рН — 7,0—7,2. Бобовый отвар готовят следующим образом: 50 г бобов (белой фасоли или гороха) заливают 1 л водопроводной воды и варят до набухания и растрескивания кожуры, но ие до полного разваривания. Отвар фильтруют через вату или несколько слоев марли и доводят объем до 1 л. 5 Маниитно-дрожжевая среда для клубеньковых бактерий (г): маииит — 10,0; дрожжевой экстракт — 1,0; К2НР04 — 0,5; MgS04-7H20 — 0,2; NaCl — 0,1—0,2; FeCh-бНгО — 0,002; агар — 15,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8-7,0. Среда Траутвейна для Thiobacillus denitrificans Состав (г): Na2S203-5H50 — 2,0; NH4C1 — 0,1; Na2HP042H20 — 0,1; MgCl2-6H20 — 0,1; KN03 — ll,0; NaHC03 — 0,1; раствор микроэлементов по Древсу — 5 мл; рН — 7,0. Раствор микроэлементов по Древсу (Drews, il976), мг: ЭДТА Na — 800; MnCl24H20 — 10; СоС12-6Н^О — 4; CuS04 — 1; N32Mo04-2H20 — 3; ZnCl2 —2, LiCl — 0,5; SnCl2-2H20 - 0,5; H3B03 — 1; KBr — 2; Кл — 2; BaCl2 — 0,5; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,0. На I л среды добавляют от 5 до 10 мл этого раствора. Среда Снльвермана и Люндгреиа 9К для Thiobacillus ferrooxidans 1-й раствор: в 700 мл дистиллированной воды растворяют (г): (NH4)2S04 — 3,0; К2НР04 — 0,5; КС1 — 0Л; MgS04-7H20 — 0,5; Ca(NO3)2-4H2O~0,0K 2-й раствор: в 300 мл дистиллированной воды растворяют 44,2 г FeS04-7H20 и добавляют 1 мл 10 и. серной кислоты. Растворы стерилизуют отдельно и смешивают перед посевом. рН среды 2,5. Среда Казерера для воДОРОДОКИСЛЯЮЩНХ бЭКтерий Состав (г): NH4Cl— 1,0; К2НР04 - 0,5; MgS04-7H20 - 0,2; NaHCOa — 0,5; раствор микроэлементов по Древсу — 10 мл; рН 7,0, вода дистиллированная — 1000 мл. После посева колбы помещают в эксикатор, заполненный газовой смесью состава (%): СО* — 10; Ог — 5—30; Н2 — 60—85; все газовые смеси для водород ных бактерий взрывоопасны, поэтому при работе необходимо строго соблю дать правила техники безопасности! Среды для сульфатвосстанавливающих бактерий Компоненты, г/л Баар Постгейта дистиллированной воды В Лактат Na 3,5 мл 3,5 мл Дрожжевой экстракт — 1,0 NH4C1 1,0 1,0 CaS04-H20 1,0 1,0 КН2Р04 0,5 0,5 MgSCy7H20 2,0 2,0 FeS04-7H20* — 0,5 (NH4)2Fe(S04)2-6H20 (соль Мора) 0,5 — Раствор ?ликроэлементов по Пфеннигу (состав см. 1 мл с. 207)** — 1%-ный раствор Na2S 5—8 мл 0,5 мл в 1%-ном растворе NaHC03** 7,0-7,5 рН 7,0-7,5 * Сернокислое железо растворяют в 1%-ной НС1, стерилизуют и добавляют в стерильную среду перед посевом. ** Стерилизуют отдельно и добавляют в стерильную среду перед посевом;» Среды для тиоиовых бактерий Компоненты, г/л дистиллированной воды Среда Вак-смана для Thiobacillus thiooxidans Среда Старки для Thiobacillus thioparus Сера (серный цвет)* 10,0 или Na2S2Cv5H20** 5,0 5,0 (NH4)2S04 0,3 0,2 КН2РО4 3,0 3,0 СаС12.6Н20 0,25 0,25 MgSCy7H20 0,5 0,5 FeS04-7H20 0,01 0,01 Раствор микроэлемен- 10 мл тов по Древсу 10 мл рН 4,0—5,0 7,5—8,0 * Серу стерилизуют текучим паром или спиртом 2 ч, затем спирт испаряют в сушильном шкафу при 50°. ** Стерилизуют отдельно и вносят в среду перед посевом. К двум последним средам для обогащения их факторами роста добавляют иногда дрожжевой или мясной экстракты в количестве 2—6 г на 1 л среды. Среды для мицелиальных грибов 1. 3—4 °В сусло. 2. Пептонио-декстрозный агар Ваксмана состава (г): глюкоза — 10,0; пептон — 5,0; КН2Р04 |
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 |
Скачать книгу "Руководство к практическим занятиям по микробиологии" (2.03Mb) |
[каталог] [статьи] [доска объявлений] [обратная связь] |